鸭不同MHC单倍型对禽流感重组疫苗免疫效果的影响.pdf

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1、第31卷第3期实验动物科学Vo1．31NO．32014年6月LAB0RATORYANIMALSCIENCEJune2014驴研究报告、；护、：、2鸭不同MHC单倍型对禽流感重组疫苗免疫效果的影响赵丽丽杨超张晓娜廉传江文辉强柳金雄陈洪岩陈化兰韩凌霞(1．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队，哈尔滨150001)(2．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感与防控团队，哈尔滨150001)摘要：目的不同品系的鸭对禽流感(AI)疫苗诱导的效价有差异，分析这种差异是否与主要组织相容性复合体(MHC)有关。方法用表达H5亚型禽流感

2、HA基因重组鸭瘟活载体疫苗免疫抗原提呈相关转运体TAP基因等位基因型不同的4种SPF鸭，比较其血清HI动态变化。结果免疫后连续观察的9周中，B3群SPF鸭HI抗体效价始终显著高于另外3个群。结论鸭的不同MHC单倍型可能与AI疫苗的不同免疫效力相关。关键词：禽流感疫苗；主要组织相容性复合体；SPF鸭；Hl效价中图分类号：Q95—33文献标识码：A文章编号：1006—6179(2014)03—0030~3HBK—SPF鸭是中国农业科学院哈尔滨兽医研诱导产生的抗体也存在差异。为了研究这种疫究所实验动物中心在绍兴麻鸭I号基础上经过病原病致病性

3、或免疫应答的差异与宿主的MHC多态性微生物净化培育成功的无特定病原体(Specific有无关系，本研究利用鸭瘟病毒AIV重组弱毒疫苗pathogen。free，SPF)鸭，目前已排除鸭病毒性肝炎等免疫4个MHC单倍型SPF鸭群，分析血清HI抗体多种重大疫病，具有系统的繁育谱系，成为优良的实效价的动态变化。验动物。前期研究中，根据位于主要组织相容性复合体(Majorhistoc0mpatibilitycomplex，MHC)区域的1材料和方法MHCI类抗原分子重链编码基因和抗原提呈转运蛋白编码基因(Transporterassociat

4、edwithantigen1．1材料processing，TAP)的微卫星标记多态性分析结果，1413龄B1、B2、B3、B4、B2／B4HBK·SPF鸭由HBK．SPF鸭群在TAP1基因存在4种纯合等位基因中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心提型。MHC区域紧密连锁，以TAP1等位基因纯合个供，实验动物生产许可证号为SCXK(黑)2011—007，体选育建立的MHC纯合单倍型鸭群(命名为B1、其中B2／B4鸭为B2和B4杂合单倍型。以鸭肠炎B2、B3和B4单倍型鸭)具有同种异型的特征，成病毒为载体表达AIVH5N1HA基因的重

5、组活病毒为研究禽抗病免疫应答遗传学机制的珍贵实验疫苗(rDEV．re6)E6]由中国农业科学院哈尔滨兽医材料。研究所动物流感团队柳金雄博士提供。禽流感(AvianInfluenza，AI)是目前备受全世1．2免疫界关注的重要疫病之一，给养禽业和人类健康带来以14日龄B1l2只、B25只、B36只、B44只巨大威胁’。鸭是禽流感病毒(Avianinfluenza和B2／B44只SPF鸭为实验组，另外12只B1鸭为virus，AIV)的重要储存宿主，但近年来随着毒株的对照组。实验组腿部肌肉注射rDEV—re6，每羽变异，部分亚型可以导致鸭

6、发病，但是致病性与鸭的10。TCID首免后4周以同等剂量加强免疫，二免品种有关，同时有研究表明不同品种的鸭对AI疫苗后4周结束实验。对照组接种等体积细胞培养液收稿日期：2014—05—09基金项目：国家自然科学基金(No．31101800)；国家科技支撑课题(No．2013BAK11B02)作者简介：赵丽丽(1983一)，女，助理研究员。研究方向：实验动物病。E—mail：zhaolili213@163．corn通信作者：韩凌霞(1971一)，女，副研究员。研究方向：实验动物免疫遗传学。E—mail：hlx1993@126．corn第

7、3期赵丽丽等：鸭不同MHC单倍型对禽流感重组疫苗免疫效果的影响·31·MEM。实验组和对照组分别于免疫前和首免后每比，番鸭如表。I／$现鼹更严H}重I的精神症状和平均死亡时间偏765432O周翅静脉采血，分离血清，一80％冻存。低。然而，在攻毒2d后，北京鸭的体温和血液中的1．3血凝抑制(HI)效价的测定一氧化氮水平均高于番鸭，提示两种品系鸭天然免HA和HI检测方法根据国家标准(GB／T一疫应答水平不同。野鸭免疫H5Nl高致病性禽18936—2003)进行。流感灭活疫苗毒株产生的临床症状和抗体产生情况等又与北京鸭和番鸭不同”。刘文兴等

8、对种番鸭、2结果北京鸭和雏番鸭三群鸭免疫H5N1高致病性禽流感灭活疫苗，连续22周检测抗体产生情况，免疫2周疫苗免疫后1周，B4组部分鸭HI抗体呈阳性，后各组鸭抗体水平迅速上升，三者之间存在差异，可免疫后2周后其余各组鸭