三种免疫增强剂对禽流感疫苗免疫效果的影响.pdf

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1、2014年24(2)生物技术872．3NZNjl1、MLB、CLB的摇瓶发酵菌株，其产量为6．41g／L，得率为0．53gig，其次是C一1菌株，大肠杆菌双基因缺失菌株NZN111、MLB、CLB菌株的摇产量为5．58g／L，得率为0．47g／g，而产量最低的是W3110，其瓶发酵木糖结果如表3。产量只有4．23g／L，得率仅有0．34g／g，为选取优良野生菌发表3菌株NZN111、MLB、CLB的摇瓶发酵木糖效果比较酵木糖产琥珀酸提供了一定的依据。并利用Red重组法敲除Table3ComparisonofxylosefermentationofNZN111，MLB。MLBZ野生菌的ldh

2、A与B，构建了两株双基因缺失型菌株，发酵结inflasks果表明琥珀酸对木糖的得率显著提高，达到0．90g／g，与王健叫等人研究结论相比，得率提高了50％。目前，以木糖为碳源发酵产琥珀酸的研究不多，特别是厌氧发酵的研究较少，当前热点主要集中在利用葡萄糖发酵产琥珀酸。然而，木糖是木质纤维素水解液的重要组分，是除葡萄糖以外第二丰富的单糖，利用木糖产琥珀酸同样具有广阔的前景。本研究结果表明利用木糖为碳源发酵产琥珀酸虽然得率较高(达到从表3可以看出，菌株的ldhA和pflB双缺失后，对于提高0．92g／g)，然而产量仍然较低，如何在发酵罐中通过发酵优化菌株的产酸得率非常有效，MLB与NZN111基

3、于木糖产琥珀来提高琥珀酸的产量也是下一步研究中亟待解决的问题。酸的得率基本一致，分别为0．89g／g与0．9og／g，而CLB略高参考文献：为0．92g／g，三个菌株的产物和副产物的产量比较接近。与野[1]王庆昭，吴巍，赵学明．生物转化法制取琥珀酸及其衍生物的前景生型菌株比较，木糖的消耗没有减少，统计学结果显示这三组分析[J]．化工进展，2004，23：794—798．数据P值为0．145>0．05，表明这三株双缺失菌株产琥珀酸显[2]WerpyToddA，HolladayJohnE，WhiteJamesF，eta1．Topvalue著性差异不明显，与野生型菌株相比，双缺失后菌株之间的产a

4、ddedchemicalsfrombiomass：I．Resultsofscreeningforpotentialcandi—琥珀酸能力的差异缩小。但与野生型菌株相比琥珀酸的产量datesfromsugarsandsynthesisgas[R]．PNNL一14808，2004．和得率都有显著提高，将表3中MLB、CLB菌株与表2中[3]KaemwichJantama，ZhangXueli，SASvoronos，eta1．EliminatingsideMG1655，、C一1菌株琥珀酸产量进行统计学分析可得其P值分productsandincreasingsuccinateyieldsineI

5、1西neeredstrainsofEscherichiacoli别为0．00069<0．001、0．0OO44<0．001，这表明双缺失菌株与C[J]．BlotechnologyBioengineering，2OO8，lO1(5)：881—893．其对应的野生菌产琥珀酸的量在统计学上的差异极其显著。[4]邝生鲁，贡长生．琥珀酸的开发与应用前景[J]．化工时刊，1991，(1)：24—25．．MG1655菌株琥珀酸对木糖得率为0．40±001g／g，敲除基因[5]詹晓北，朱一晖，王东海．琥珀酸发酵生产工艺及其产品市场[J]．ldhA与B后，得率提高到0、．89-4-0．02g／g；而C一1菌

6、株琥食品添加剂，2003，(2)：44—49．珀酸对木糖得率为0．47±0．01g／g，敲除基因ldhA与B后，[6]吴辉，李志敏，叶勤．果糖和麦芽糖作为有氧碳源对大肠杆菌得率提高到0．90±0．02g／g。CLB菌株的乙酸生成变化不大，NZN111两阶段发酵中厌氧发酵的影响[J]．生物工程学报，2011，27而MLB和NZN111的乙酸生成明显减少，而乳酸基本检测不(5)：1299—1308．到，因此乳酸脱氢酶的敲除对副产物乳酸的合成能够有效的[7]KirillADatsenko，BarryLWanner．One—stepinactivationofchromo—控制，并且考虑到乳酸合成

7、途径中NADH的需求，该途径的活somalgenesinEscherichiacoliK一12usingPCRproducts[J]．PNAS，性确实造成了琥珀酸NADH途径流量的竞争。丙酮酸甲酸裂2000，97(15)：6640—6645．解酶能够催化丙酮酸裂解为甲酸，甲酸在甲酸脱氢酶(．formate[8]GP6sfai，MDKoob，HAKirkpatrick，eta1．VersatileInse~ionplas—