不同免疫佐剂对丙肝核酸疫苗效果的论文

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1、不同免疫佐剂对丙肝核酸疫苗效果的论文【摘要】目的：观察不同佐剂对hcvdna疫苗效果的影响。方法：雌性balb/c小鼠分别用脂质体ddab/epc和dcchol/dope、montanideisa720和氢氧化铝为佐剂的hcvdna疫苗免疫3次，elispot法观察脾淋巴细胞受hcv核心、e2、e1/e2、ns3和ns5b蛋白刺激后细胞因子的产生。结果：ddab/epc组产生ifnγ较多，在大部分情况下，显著高于其它组。该组il2的产生也显著高于其它4组。该组il4的产生，在某些情况下也高于其它组。用ns5b刺激，氢氧化铝组il4的产生显著高于其它4组(p<0.05)

2、。裸dna和两种脂质体组ifnγ的产生高于il4，而montanide和氢氧化铝组il4的产生高于ifnγ。结论：在4种佐剂中，ddab/epc效果最好，montanide和氢氧化铝可将dna疫苗th1为主的免疫特性转换为以th2为主。【关键词】核酸疫苗丙型肝炎病毒免疫佐剂　　immunologicaleffectsofdifferentadjuvantsonhcvdnavaccine　　jinbo,richardyanhuiesentofdigestivediseases,navalgeneralhospital,beijing100037,china　　［abstract

3、］objective:theimmunologicaleffectsofhcvdnavaccineice.methods:femalebalb/cmiceededdab/epcordcchol/dope,hcvdnamixedontanideisa720oraluminumhydroxide,respectively,andboostedtostcases,splenocytesfrommicevaccinatedeproducedmoreifnγ.thesesplenocytesalsohavesignificanthigheril2productionparedalumgr

4、ouphavesignificanceinil4productionparededil4innakeddna,ddab/epc,anddcchol/dopegroupsountedifnγinalumandmontanidegroups.conclusion:encapsulationeddab/epchasthestrongestadjuvanteffectininducingth1dominatedimmunity.alumandmontanidecanconverttheth1natureofdnavaccinetoth2biasedimmunity.　　［keymuno

5、logicadjuvants　　丙型肝炎病毒(hepatitiscvirus,hcv)感染是一个严重的全球性健康问题。.cOm据世界卫生组织在1999年的调查结果表明，全世界有大约一亿七千万人感染丙型肝炎病毒，占全世界人口总数的3%［1］。　　在丙型肝炎病毒感染后，虽然机体可以产生很强的体液免疫反应，但仍有75%～85%的急性丙型肝炎病毒感染者不能清除病毒而成为慢性感染者。抗hcv的中和抗体虽然在一定情况下有助于病毒的清除,但由于丙型肝炎病毒在患者体内可以不断发生演变，从而产生对中和性抗体有抗性的突变株。　　因此,虽然有hcv的中和抗体存在，但细胞免疫反应在防止和清除hcv感染过程中显

6、得更为重要。因此，诱导产生针对hcv的特异性细胞免疫反应就不可避免地成为hcv疫苗研究的重点［2］。　　dna疫苗可诱导以i型辅助性t细胞(thelpercelltypeⅰ,th1)介导的细胞免疫。为观察不同类型免疫佐剂对hcvdna疫苗免疫效果的影响，我们比较了小鼠接种几种不同佐剂辅佐的hcvdna疫苗后免疫反应的改变。　　1材料与方法　　1.1hcvdna重组质粒的构建将hcv1a型h株核心、e1、e2蛋白基因(1～746位氨基酸，核酸342～2579)插入pvax1质粒(美国invitrogencorp.)bamhⅰ限制酶切点，转化大肠杆菌增殖，用endofreeplasmi

7、dgigakit(美国qiagen)纯化。将重组质粒转染chok1细胞，裂解细胞做hⅰ位点，转化大肠杆菌dh5αf’iq，acia)ncoⅰ位点，转化dh5α株大肠杆菌表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化(分子量18000)。　　1.2.3hcve1/e2重组蛋白用bactobacbaculovirusexpressionsystems(美国invitrogen)。hcv核心、e1和e2基因(1～746位氨基酸，核酸342～2579