酶辅助超声法提取蒙药瞿麦总皂苷的工艺研究及含量测定.pdf

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1、中国中医药科技2014年7月第21卷第4期July2014Vo1．21No．4·403·酶辅助超声法提取蒙药瞿麦总皂苷的工艺研究及含量测定木陈建平布仁王来兵朱晓伟张英吴冬梅牧丹郭晓宇王琳琳赵国丁(内蒙古医科大学药学院-呼和浩特010110)摘要目的：优选出酶辅助超声法提取蒙药瞿麦总皂苷的最佳提取工艺，并建立蒙药瞿麦总皂苷的含量测定方法。方法：以薯蓣皂苷元为对照品，采用紫外分光光度法，以香草醛一冰醋酸一高氯酸为显色剂，在410nm处测定吸光度，计算瞿麦中总皂苷含量，以总皂苷含量为评价指标，先后通过单因素试验和正交试验，对酶辅助超声提取法进行优化。结果：优化后的超声提取蒙药瞿麦总

2、皂苷最佳工艺条件为酶用量4．0mg，超声功率180W，超声时间15分钟，料液比1：30，4因素影响顺序为料液比>超声功率>酶用量>超声时间，测得蒙药瞿麦总皂苷含量为2．367％，平均回收率为98．39％，RSD为0．51％。结论：该工艺为酶辅助超声提取蒙药瞿麦总皂苷的最佳工艺，采用紫外分光光度法测定瞿麦总皂苷，操作简便、灵敏度高、重现性好，稳定性高，可作为瞿麦药材总皂苷的含量测定方法。关键词瞿麦总皂苷含量测定提取工艺酶辅助超声法蒙药瞿麦DianthussuperbusL，别名十样景花、竹节草花、山瞿海亚荣生化仪器厂；电子恒温不锈钢水浴锅：余姚市上通温麦、剪绒花，蒙药名：高优一

3、巴沙嘎，属石竹科多年生草本植控仪表厂；KH5200DE型高功率数控超声清洗器：昆山禾创物【Ij，全草入药，性苦、寒、辛、无毒，具有利尿通淋、破血通经超声仪器有限公司；PHS一25酸度计：成都世纪方舟科技有功效，用于热淋、血淋、小便不通、淋沥涩痛、月经闭止，是蒙医限公司。常用药之一L2J。瞿麦皂苷具有免疫作用，能抑制人体B细胞1．2药品与试剂瞿麦：内蒙古天立药业，经内蒙古医科大免疫球蛋白的分泌；还具有抑菌杀虫作用。瞿麦的水和乙醇学药学院药用植物教研室乔俊缠教授鉴定为石竹科植物瞿提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和变形杆菌麦DianthussuperbusL的带花地上部分

4、；薯蓣皂苷元对照均有抑制作用；抗脂质过氧化；兴奋子宫；抗肿瘤作用；溶品：中国药品生物制品检定所提供，批号：l11539—200001。血作用；具有心血管药理活性，表现为正性肌力、抗心律失常、淀粉酶：江苏无锡，活性单位1万U／g；无水乙醇、冰乙酸、正舒张血管、降低血压、止痛和保护毛细血管等作用。本实验采丁醇、香草醛、高氯酸、石油醚：均为分析纯。用酶辅助超声法提取蒙药瞿麦中总皂苷，酶能够破坏植物细2方法胞壁，使有效成分快速溶出L6l，而超声波产生的振动作用加2．1对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的薯蓣皂苷强了胞内物质的释放、扩散和溶解，从而显著提高提取效率。元对照品5．0mg，

5、用无水乙醇溶解，定容至25mL，摇匀，即得总皂苷的测定方法有重量法、UV、TIES、HPLC、GC—MS200lag·mL薯蓣皂苷元对照品溶液。法。目前对蒙药瞿麦总皂苷的含量测定尚未见报道，本2．2供试品溶液的制备精密称取蒙药瞿麦粉末1．0g，加文建立了酶辅助超声法提取蒙药瞿麦中总皂苷及含量测定方lOmL石油醚于50'13水浴加热回流2小时，过滤，干燥至无法，为以后的研究提供理论指导与实验基础。石油醚味，将其置于锥形瓶中，加入pH为6．0的HAe—1材料NaAc缓冲液，浸泡30分钟，加入一定量的淀粉酶，60~C[1o11．1仪器Tu一1901型双光束紫外分光光度计：北京普析水

6、浴加热30分钟，然后于95℃水浴灭酶10分钟，取出后放通用有限责任公司；LX一07A多功能粉碎机：上海江信科技置至室温，超声，过滤，滤液与水饱和正丁醇以等体积萃取，有限公司；电热鼓风干燥箱：上海一恒科学仪器有限公司：萃取3次，合并滤液，挥干，用无水乙醇洗出，定容至25mL。AB135一分析天平：MadeinSwitzerland；BSA124S型电子天在提取工艺研究中改变相应参数。平：北京赛多利斯科学仪器有限公司；旋转蒸发仪：上海亚荣2．3测定波长的选择精密量取对照品和供试品溶液0．5生化仪器厂；循环水式多用真空泵：郑州长城科工贸有限公mL于10mL具塞试管中，于60℃水浴挥

7、干，加入0．2mL5％司；旋转蒸发仪：郑州长城科工贸有限公司；恒温水浴锅：上香草醛一冰醋酸溶液，0．8mL高氯酸于60~C水浴加热20分钟，取出放置2分钟，加人冰醋酸定容至10mL摇匀，放置15内蒙古医科大学本科教学工程项目“教坛新秀”No．NYYXZJ201304内蒙古医科大学青年创新基金项目No．YKD2013QNCX013分钟，在300～600nm范围内做波长扫描。结果显示对照品内蒙古医科大学大学生“英才培育”项目No．2014YCPY015和供试品均在410nm处有最大吸收，故选择410nm做为