绞股蓝总皂苷提取工艺研究

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1、绞股蓝总皂苷提取工艺研究【摘要】目的研究绞股蓝总皂苷的提取工艺。方法采用正交试验设计法,以绞股蓝总皂苷提取量为考察指标,对影响绞股蓝总皂苷提取工艺的因素进行了优选。结果提取时间、提取次数对提取效果有显著影响,乙醇用量的影响不显著。结论绞股蓝总皂苷的最佳提取工艺为：药材加8倍量70%的乙醇,回流提取3次,每次2h。【关键词】绞股蓝总皂苷；提取工艺；正交设计Abstract：ObjectiveTostudytheextractiontechniquesoftotalsaponininGynostemma.Meth

2、odAccordingtothetotalsaponinextractingrate,theextractingtechniquesizedbyorthogonaldesign.ResultsThefactorsthatextractingtimeandextractingtimeshavesignificanteffectontotalsaponinextraction,andtheamountofalcoholsolutionhasinsignificanteffectonit.ConclusionThe

3、optimalextractingtechniquesese.　　Keymatotalsaponin；extractingtechniques；orthogonaldesign　　绞股蓝(Gynostemma)为葫芦科绞股蓝属多年生蔓生草本植物,主要含有皂苷、黄酮、多糖,还含有人体必须的多种氨基酸、维生素和微量元素等成分。现代药理学研究表明,绞股蓝具有抑制肿瘤、抗衰老、降低血脂、增强免疫力和保护心脏的作用[1]。绞股蓝总皂苷片作为药品已经上市多年,用于高脂血症,见有心悸气短、胸闷肢麻、眩晕头痛、健忘耳鸣、自汗

4、乏力或脘腹胀满等心脾气虚、痰阻血瘀者。为了最大限度提取并保持绞股蓝的有效成分,保证绞股蓝药材资源的充分利用,提高经济效益,本研究用正交试验优选绞股蓝提取工艺。　　1仪器与试药　　UV-2601型紫外分光光度计(岛津)；人参皂苷Rb1对照品(中国药品生物制品检定所)。冰醋酸、高氯酸、甲醇、香草醛、正丁醇、石油醚等均为分析纯。样品：七叶绞股蓝茎叶混合物,产于四川卧龙地区。　　2方法　　2.1标准曲线的制备[2]精密称取人参皂苷Rb1对照品10mg置5mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓度为2.0mg

5、/mL的储备液。精密量取储备液50、100、150、200、250μL分别置15mL具塞试管中,挥干甲醇,分别加入新配置的5%香草醛冰醋酸溶液0.4mL、高氯酸1.6mL,摇匀,密塞,置60℃水浴中加热15min后取出,立即用冷水冷却至室温,分别精密加入冰醋酸10mL,摇匀,作为供试品溶液。另精密量取甲醇溶液250μL置15mL具塞试管中,按照上述操作,到加入冰醋酸10mL摇匀为止,作为空白溶液。取供试品溶液和空白溶液,照分光光度法[《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅦA]试验,在560nm的波长处分别测定吸

6、收度。以人参皂苷Rb1的量X(mg)对吸收度A进行回归,得标准曲线方程为：A=1.2757X+0.0019,r=0.9989。结果表明,当取样量在0.102～0.510mg范围内时,人参皂苷Rb1的含量与吸收度呈良好的线性关系。　　2.2绞股蓝总皂苷含量测定方法　　精密称取绞股蓝总皂苷粉末20mg置5mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取200μL置15mL具塞试管中,挥干甲醇后按“2.1”项下操作,测定吸收度,用标准曲线计算出绞股蓝总皂苷的含量。　　2.3绞股蓝总皂苷的提取工艺将干燥的绞股蓝药

7、材粉碎成粗粉,准确称量100g置圆底烧瓶中,用70%乙醇多次回流提取,合并提取液,用旋转蒸发器浓缩后减压干燥,干燥物用1000mL的热水充分溶解,加入同体积的石油醚萃取3次,将水层溶液用同体积的水饱和的正丁醇反复萃取,至正丁醇层无色为止,合并正丁醇提取液,用旋转蒸发器浓缩后减压干燥,即得。　　2.4绞股蓝总皂苷提取工艺的正交设计　　根据初步试验结果,选用L9(34)正交试验表,以乙醇用量(A)、提取时间(B)、提取次数(C)为试验因素,每个因素取3个水平(见表1)。取样品,按照正交设计进行实验,以绞股蓝总皂苷

8、的提取量为考察指标,进行提取工艺的优选。表1正交试验因素水平表（略）　　2.5绞股蓝总皂苷提取工艺的稳定性试验按照正交试验选择的工艺条件,重复进行绞股蓝总皂苷的提取,并依法测定绞股蓝总皂苷的含量,评价正交试验选择的工艺条件是否稳定。　　3结果　　3.1正交试验结果按表1的因素水平设计,正交试验结果见表2,方差分析见表3。由表2中极差的直观分析法R值可以看出,因素B的极差0.56为最大,说明它是A、B