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1、绞股蓝中有效成分皂苷的提取工艺研究综述一、绞股蓝皂苷提取工艺1、水提醇沉法：将绞股蓝全草切细,用水浸过料面,加热提取三次,合并提取液,浓缩成流浸膏状,冷却后加入乙醇,至不再产生沉淀,再经过滤、浓缩、干燥,即得到粗制绞股蓝总皂苷2、溶剂提取法：绞股蓝全草的粗粉,用乙醇或甲醇提取,回收乙醇或甲醇后用正丁醇萃取,回收正丁醇干燥得总绞股蓝总皂苷3、丙酮沉淀法：绞股蓝粗粉用乙醇回流提取,减压回收醇后的浓缩液,加入丙酮,析出大量的沉淀,收集沉淀物再真空干燥即得绞股蓝总皂苷4、酶法：酶法提取工艺主要是利用纤维素酶及果
2、胶酶对纤维素、果胶进行处理，从而提高绞股蓝皂苷的提取效率5、微波提取法：微波辅助提取技术是天然产物提取的一种非常有发展潜力的新型技术，该技术可以加快反应速度，提高植物细胞破碎力度，从而提高皂苷提取率6、超声波辅助提取：超声波提取原理为:利用超声波破碎细胞(空化)和强化传质((机械作用)，使溶剂分子渗透到组织细胞中，能更好地与溶质分子接触，使细胞中可溶成分更好地释放出来。7、大孔树脂法：将绞股蓝加入水煮沸提取,过滤提取液,澄清,将上清液通入大孔树脂吸附,用碱液冲洗柱子至流出液无色,再用水冲洗至中性,然后用
3、原料5一8倍量50%一95%乙醇洗脱,脱除乙醇经干燥处理得股蓝总皂苷制品8、超临界流体萃取技术(SFE)：超临界流体是指超过临界温度(TC)和临界压力(PC)的非凝缩性的高密度流体,可作为SF的物质很多,有二氧化碳、三氟甲烷等,其中二氧化碳临界温度接近室温且无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、价廉!易制成高纯气体,因而成为应用最广泛的SF。因为处于临界压力以上状态时,会使液体和气体成为均相的流体,它们的粘度!密度和扩散系数均界于气体和液体之间,尤其是与溶解能力有密切关系的密度比气体数大百倍。利用这些性质
4、进行超临界流体萃取(SFE)比溶液萃取的效果要优越,特别在中药材及其制剂中更显示出独特的优点,主要是提取简便!快速,可直接进样分析;提取具有一定的选择性,提取的杂质较少9、膜分离技术：膜分离技术是利用具有选择通透性的薄膜,以外界能量或化学位差为推动力,对多组分体系进行分离、分级、提纯的一门技术。该技术具有分离效率高、无相变、能耗低、操作简便、对环境无污染等优点。二、绞股蓝提取工艺流程1.水浴法提取精确称取10.009粉碎后的绞股蓝叶粉,置于三角烧瓶中,根据试验设计加入一定量水,在恒温水浴锅中按照不同的提
5、取时间和提取温度进行提取,将提取液先用筛网粗滤,然后用定性滤纸过滤,再干燥至恒重后称重,得到水浸出物质量,计算提取得率"提取得率=提取物质量÷10x100%"2.微波辅助提取精确称取10.00g摊过20目筛的绞股蓝叶粉,置于三角烧瓶中,根据试验设计加入一定量水,按照不同的加热时间!微波功率以及不同的料液比进行微波处理,然后进行水浴恒温提取,提取结束后,将提取液先用筛网粗滤,再用定性滤纸过滤,干燥至恒重后称重,得到水浸出物质量,计算提取得率(同上)3.超声波提取精确称取10.00g过20目筛的绞股蓝叶粉,
6、置于三角烧瓶中,根据试验设计加入一定量水,按照不同的提取时间!超声波功率!提取温度以及不同的料液比进行超声波提取,提取结束后,将提取液先用筛网粗滤,再用定性滤纸过滤,干燥至恒重后称重,得到水浸出物质量,计算提取得率(同上）三．含量测定的方法1.5%香草醛冰醋酸的配备称取1.66g香草醛置于100mL的三角瓶中，用移液管移取30mL的冰醋酸，摇匀并使香草醛完全溶于冰醋酸中，现配现用。2.标准曲线的绘制精密称取人参皂苷Rb1标准品4.5mg，溶解于4.5mL甲醇中，配成浓度为1.00mg/mL的标准液，分别
7、取20µL、40µL、60µL、80µL、100µL置于10mL试管中,于80℃条件下烘干甲醇后各加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL，摇匀。置60℃恒温水浴中加热显色15min，取出，于冰水中冷却5min后，各加冰醋酸5mL，混匀，随行试剂做空白，于550nm处测定其吸光值A，以人参皂苷Rb1的量（mg）为横坐标和吸光值A为纵坐标，绘制人参皂苷Rb1的标准曲线，得出回归方程。以吸收值A与皂苷含量C(mg)做回归处理，得标准曲线，结果求出回归方程为：A=3.8433C-0.02
8、70(R2=0.9997)。表明绞股蓝总皂甙含量在0.020到0.100mg之间有良好的线性关系。3.绞股蓝皂苷含量、提取率测定的计算公式绞股蓝总皂苷含量的测定：分别吸取100µL（V1）样液置于10mL试管中，按上述方法测其吸光值A，代入回归方程可得所测样液绞股蓝总皂苷的含量C。再根据下列公式计算各部分样液的绞股蓝总皂苷含量M1。其中：M1——总样液中绞股蓝总皂苷含量；C——100µL样液的皂苷含量，mg；V1——取样体积，µL；V2——
