甲状腺乳头状癌组织中CD105的表达及其临床意义.doc

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1、甲状腺乳头状癌组织中CD105的表达及其临床意义【关键词】乳头状癌;淋巴转移;微血管密度;免疫组化1材料与方法1.1材料选取我院甲状腺乳头状癌组织存档蜡块标60例;正常甲状腺组织存档蜡块标木20例,均来源于切除结节性甲状腺肿和甲状腺肿瘤手术时,肿瘤周围的少许正常腺体组织,其屮男11例,女9例;良性甲状腺肿瘤组织存档蜡块标木30例,来源于良性甲状腺肿瘤患者手术时切除的肿瘤组织,其中男14例,女16例,年龄2旷60岁。甲状腺乳头状癌患者中男17例,女43例;年龄16〜68岁,平均42岁。其屮淋巴结转移39例,无淋巴结转移21例。所有标本均为有完整的资料。1.

2、2试剂CD105单克隆抗体(鼠抗人)为美国ZYMED公司产品、S?P试剂盒和DAB试剂盒,均购自北京屮杉金桥生物技术公司。1.3方法标木经14%甲醛尚定,常规脱水透明、石蜡包埋,多聚赖氨酸防脱处理载玻片,切片厚度4.0?m。常规脱蜡水化浸于蒸懾水屮备用。采用0.01mol/L柠檬酸缓冲液(pH值6.0)高温高压抗原修方法,将修复过的组织切片磷酸盐缓冲溶液冲洗3次,每次3min,甩去磷酸盐缓冲溶液,每张切片加50n1AviclimSolution,室温下孵育10min。磷酸盐缓冲溶液冲洗2次,每次3min,甩去磷酸盐缓冲溶液,每张切片加50uduBinti

3、nSolution,室温下孵冇10min,磷酸盐缓冲溶液冲洗2次,毎次3min备用。免疫纟R化染色:上述备用切片每张切片加50U1一抗,室温下孵育60min;磷酸盐缓冲溶液冲洗3次,每次3min;每张切片加50卩1二抗,室温下孵育10min;磷酸盐缓冲溶液冲洗3次,每次3min;每张切片加100u1链亲和素过氧化物酶溶液,室温下孵育10min;磷酸盐缓冲溶液冲洗3次,每次3min;每张切片加100U1新鲜配制的DAB溶液,显色5~10min;自来水冲洗,苏木素浅染,自来水冲洗泛蓝,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,屮性树胶封闭。以磷酸盐缓冲溶液为阴性对照,以已知

4、阳性片为阳性对照。1.4结果判定标准CD105以肿瘤血管内皮细胞膜上呈现棕黄色为阳性标准。具体判定标准:排除出血坏死、纤维硬化区域及带有较厚肌层的血管,寻找血管内皮细胞或内皮细胞簇着色可与周围血管、肿瘤细胞及其他结缔纟R织分开的血管,无论腔隙大小,均以其断面多少计数。低倍镜下观察确定每例切片屮3个肿痫血管密度最高区域,即“热点”,白然在100倍镜下计数3个高倍视野内微血管数,取其平均值作为微血管密度(MVD)值。2结果正常甲状腺纽•织及甲状腺腺瘤均无CD105的表达,遂归为一组。甲状腺乳头状癌组60例CD105呈阳性表达41例,阳性率为68.3%。2组相

5、比,差异有统计学意义(P<0・05)。甲状腺乳头状癌屮有淋巴结转移的39例中34例(87.2%)CD105呈阳性表达,无淋巴结转移的21例中7例(33.3%)CD105呈阳性表达,两者比较差异有统计学意义(P〈0.05)。CD105标记的MVD值:甲状腺乳头状癌CD105标记的MVD值淋巴结转移组为(70±9),未转移组为(45±8),二者比较差异有统计学意义(P〈0.05)。3讨论CD105又名Endoglin,其主要作用为抑制转化生长因了P的生物学效应,促进血管的生成。CD105主要在处于增殖状态的肿瘤血管内皮组织上强表达,与肿瘤血管的生成及肿瘤的侵

6、袭/转移密切相关,而在正常组织的血管内皮细胞上无表达。木实验屮,CD105标记的微血管密度在正常中状腺组织与良性肿瘤组织屮均无表达。而在甲状腺乳头状癌纽•织屮有表达,二者差异有统计学意义。多项研究显示CD105是一个重要的独立预后指标,可以认为CD105过度表达容易发生远处转移,预后弟,并且无淋巴结转移的虑者CD105阳性表达也提示容易发生远处转移,预后较养。木次实验,甲状腺乳头状癌屮有淋巴结转移组和无淋巴结转移纽•相比较,CD105标记的爪卩寿异有统计学意义。CD105标记的MVD值增高,是甲状腺乳头状癌病情进展和肿瘤转移的重要信号。CD105高表达,

7、MVD值越高,肿瘤转移性越强,预后越差。这提不甲状腺乳头状癌屮CD105表达及MVD值水平可作为判断临床疗效及其预后的重要指标。参考文献[1]NikiteasNI,TzanakisN,TheodoropoulosG,etal.Vascularenclo?thelialgrowthfactorandendoglin(CD105)ingastriccancer[J].GastricCancer,2007,10(1):12-17.⑵Erdem0,ErdemM,ErdemA,etal.Expressionofvascularendothelialgrowthfa

8、ctorandassessmentofmicrovasculardensityw

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