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《培养人角朊细胞中白介素15的基因表达.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、培养人角肮细胞屮白介索15的基因表达培养人角航细胞屮白介素15的基因表达屮华皮肤科杂志1998年第4期第31卷论著作者：韩钢文岩月？氏马圣清金子史男单位：100034北京医科大学笫一医院皮肤科(韩钢文马圣清)；口木福岛医科大学皮肤科(岩月？氏金了史男)关键词：角蛋白细胞；白细胞介索15；印迹法，RNA【摘要】目的为了探讨片介素15(IL-15)在表皮角航细胞屮的表达及调节。方法应用RT-PCR及Northern杂交方法分析了IL-15在培养的人角反细胞及鳞状细胞癌细胞系(HSC-5)屮的表达，并观察了地塞米松对角航细胞表达IL-15的影响。结
2、果正常角航细胞及鳞状细胞癌细胞系细胞均有IL・15mRNA的表达，10-6mol/L地塞米松处理培养的角肮细胞JS,IL-15mRNA表达水平明显降低。结论表皮细胞来源的IL-15可能介入某些炎症性皮肤病的发病过程。TheExpressionofIL・15mRNAinCulturedHumanKeratinocytesHanGangwen,KeijiIwatsuki,MaShengqing,etal.DepartmentofDermatology,FirstTeachingHospital,BeijingMedicalUniversity,B
3、eijing100034【Abstract]ObjectiveTostudytheexpressionandregulationofinterleuki(IL-15)inepidermalkeratinocytes.MethodsTheexpressionofIL-15mRNAinculturednormalhumankeratinocytes(NHKs)andhumansquamouscellcarcinomacellline(HSC-5)wasanalysed,andtheeffectofdexamethasoneonIL・15mRNAe
4、xpressionwasstudiedbyusingRT-PCRandNorthernblottingtechnique.ResultsTheresultsshowedthatbothNHKsandHSC-5expressedIL-15constitutively.ThelevelofIL-15mRNAwassignificantlydecreasedafterthecellswereculturedwith10-6Mdexamethasone.ConclusionItissuggestedthatkeratinocyte-derivedIL
5、-15mightbeinvolvedinthedevelopmentofcertaininflammatoryskindiseases・【KeyWords]Keratinocyteslnterleukin-15Blotting,Northern白介素15(IL-15)是1994年由Grabstein等[1]命名的细胞因子,分子量为14000。多种组织和细胞可产生IL-15,包括骨骼肌、胎盘、肝脏、肾脏及单核巨噬细胞、纤维细胞系及人嗜T淋巴细胞病毒型(HTLV-I)感染的T淋巴细胞,但目前认为活化的正常外周血T淋巴细胞不产生IL・15[1,2]
6、oIL-15的作用系通过结合于IL-2受体(IL-2R)的B及y亚单位而介导的,因而ILJ5的主要生物学功能类似于IL-2,如促进活化T淋巴细胞、白然杀伤(NK)细胞、肿瘤区浸润的T细胞及B细胞的生长与分化[1,3〜5]。最近有报道表皮细胞可产生IL-15,而表皮内T淋巴细胞浸润是许多炎症性皮肤病及皮肤T细胞淋巴瘤的重要特征，尤其是近年来研究发现表皮内浸润的T淋巴细胞及其衍生的细胞因了可能在某些皮肤病如银屑病等的发病机制中占有重要作用，因而设想皮肤内ILJ5可能通过T细胞作用而介入某些皮肤病的发病。为了探讨ILJ5在表皮角航细胞屮的表达及调节
7、，我们应用RT-PCR及Northern杂交方法对IL・15在培养正常人角肮细胞及鳞状细胞癌细胞系细胞中的表达及地塞米松对IL-15表达的影响进行了初步探讨。材料和方法一、细胞培养正常人角航细胞：取正常成人或流产胎儿前臂屈侧皮肤，参照Mohamadzadeh等［6］的方法进行正常人角航细胞制备与培养。培养基选用角航细胞生长培养基（KGM,CloneticsCo,USA）,第三、四代细胞用于木试验。人鳞状细胞癌细胞系：HSC-5（U山形医科大学皮肤科赠送），维持培养在5%胎牛血清的DMEM培养基屮。地塞米松处理：处于融合状态的培养细胞，HSC-
8、5及正常人角航细胞，PBS洗涤2次，分别再培养于含有或不含有10-6mol/L地塞米松的DMEM（不含胎牛血清）或KGM屮24小时，收集细胞并保存于・80°C。二、
