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时间:2018-11-23
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1、病理性瘢痕组织中角朊细胞的免疫诱导作用论文.freelo的HS(HS1),2~6mo的HS(HS2)和7~24mo的HS(HS3)标本,分别作抗ICAM-1,HLA-DR,CD3,CD4和CD8的McAb的SABC方法免疫组化染色和观察.结果各组KC表达I-CAM-1和HLA-DR抗原的阳性检出率(%)、CD3+细胞密度(cells/mm2)及CD4+/CD8+比值(x±s).freelolecule;immunopathologyAbstract:AIMToinvestigatetherelationshipbetphocytesandtheIC
2、AM-1andHLA-DRantigenexpressedbykeratinocytes(KC)ofhypertrophicscarsandkeloids.METHODSTissuesamplesdifferentpartsofkeloids(Ks)i.e.invasivepart(Ks-1),proliferativepart(Ks-P)andagedpart(Ks-A),andhypertrophicscars(HS)ofdifferentstages,i.e.HSof≤1mo.(HS1),HSof2~6mo.(HS2)andHSof7~24m
3、o.(HS3).Immunohis-tochemicalstains(SABC)inethepositiverateofICAM-1andHLA-DRantigenexpressedbyKC,thedensityofCD3+Tcell(cells/mm2)andtheratioofCD4+/CD8+cells.RESULTSThepositiveexpressionrateofI-CAM-1andHLA-DRantigenofKCineachgroupmunologicinflamma-toryresponse.Itmaybeanimportant
4、factorintheformationofKsandHS.0引言细胞间粘附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)又称CD54抗原,是淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocytefunctionassociatedanti-gen-1,LFA-1或CD11a)的配体.二者结合是免疫活性细胞向表皮移行、介导细胞间相互作用的重要条件[1].研究表明,多种皮肤病病损处的角朊细胞(ker-atinocytes,KC)可表达ICAM-1和HLA-DR抗原,正常皮肤表皮细胞不表达上述二种抗原[2,3].近年研
5、究表明,瘢痕疙瘩(keloids,Ks)和增生性瘢痕(hy-pertrophicscar,HS)与免疫介导有关.为探讨Ks与HS组织中表皮细胞(注:烧伤后HS的表皮细胞主要来自附件上皮细胞的修复)和附件上皮细胞(以下统称为KC)表达ICAM-1和HLA-DR抗原与浸润细胞的关系,我们采用连续冰冻切片和SABC技术,进行免疫组化染色和观察.1材料和方法1.1材料Ks标本13份分布于胸骨柄5份,面颈1份,肩背3份,耳垂部4份.手术切除的瘢痕块,按鲍卫汉等[4]方法,分成中央凹陷的老化部(Ks-A)9份,凸出明显的增生部(Ks-P)13份,与正常皮肤交界
6、的浸润部(Ks-I)9份,年龄2~45岁,男4例,女9例,病程1~15a.37份HS标本年龄和分布与Ks相近,男20例,女17例,系深Ⅱ度烧伤愈合后1~24mo的HS标本,其中≤1mo的HS(HS1)10份,2~6mo的HS(HS2)12份,7~24mo的HS(HS3)15份,留相同部位正常皮肤(NS)10份为对照.所有标本均来自我院门诊和住院手术治疗的患者,每个标本分为2块,1块用40gL-1多聚甲醛缓冲液(pH7.4)固定,石蜡包埋,常规病理观察,另1块OCT包埋后,于-40℃冰箱内冻存,所有标本均经临床和病理确诊,Ks主要诊断依据是侵袭性生长
7、外观和有手术复发史.鼠抗HLA-DR(mAb,北京邦定生物医学公司),鼠抗ICAM-1(CD54)、CD3(Leu4,总T细胞)、CD4(Leu3a,Th/i)和CD8(OKT8,Ts/c)mAb均购自Becton-Dickinson公司,工作浓度为150~100,SABC试剂盒购自武汉博士德公司.1.2方法连续冰冻切片厚5μm,捞于APES包被的载玻片上,风干后参照试剂说明书作SABC免疫组化染色,常规以PBS和山羊血清代替第一抗体作阴性对照和淋巴结组织作阳性对照.KC及浸润细胞胞膜上见棕黄色物质为阳性.高倍镜(×400)下采用网格测微器(5/2
8、5)观察5个不同视野内的阳性细胞浸润数,以cells/mm2表示阳性细胞密度.表达ICAM-1和HLA-DR抗原的KC常呈
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