叠鞘石斛茎段组织培养与花芽诱导【药学论文开题报告】.doc

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1、药学论文•叠鞘石斛茎段组织培养与花芽诱导【摘要】目的硏究叠鞘石斛的快速繁殖及离体开花的培养体系。方法选用野生的叠鞘石斛带侧芽的垒段作为外植体，培养在附加不同激素的培养基上。结果MS培养基附加6・BA(1.0mg-L-1)，NAA(0.5mg-L-1)对侧芽的诱导效果最佳。而MS培养基附加6-BA(2.0mg-L-1)，NAA(0.4mg-L-1)最适合丛生芽的增殖。把无菌苗培养在附加6・BA(2.0mg-L-1)的人侶培养基中，少数植株被诱导开花，诱导率为10.0%。结论用带腋芽的茎段作为外植体在MS培养基中、附加一定的6-BA和NAA可以诱导丛生芽的产生。【关键词】叠鞘石

2、斛；组织培养；花芽诱导Abstract:ObjectiveTostudyrapidpropagationandinvitrofloweringsystemforDendrobiumdenndanum.MethodsStemwithlateralbudsofwiIddenndanumwasusedasexplantsandculturedonvariousculturemediawithdifferentportionsofhormone.RcsullsThcbestmediumforlateralbudsinductionwastheMSwithadditionof6-BA

3、(1.0・1),NAA(0.5mg/L),whi1eMSwiththeadditionof6-BA(2.0mg-L-1),NAA(0.4mg-L-1)wassuitablefortheclustershootspropagation.AfewplantletswereinducedfloweringafterculturedonMSmediumwithadditionof6・BA(2.0mg-L・1),thefrequencyoffloralbudinductionwas10.0%.ConclusionTheclustershootscanbeinducedfromthes

4、egmentswithlateralbudsontheMSbasicmediumwithadditionof6・BAandNAA.Keywords:Dendrobiumdenndanum;Tissueculture;Inductionoffloralbuds石斛是常用名贵中药材，属兰科(Orchidaccnc)石斛属Ddcndrobium°现已发现，该属有很多种类具有约用价値，其中铁皮石斛、金钗石斛、霍山石斛等药用价値很高，价格昂贵。石斛中含有多种生物碱、抗癌菲、类黄酮等物质，具冇抗衰老、增强机体免疫力等作用〔1〕，其应用范围较广，需求量不断增加。但近年来由于受过度采伐、生

5、长缓慢、繁殖率低等因索的影响，使石斛的野生资源严重枯竭，我国已将其列为濒危药用植物〔2〕，为挽救石斛属的植物物种，扩大药源，前人已对多种石斛属的植物进行了组织培养快速繁殖的硏究〔3〜6〕，但对叠鞘石斛的组织培养目前尙未见报道。本文报道了叠鞘石斛茎段在不同激素配比培养基中出芽、发育成苗的过程，同时初步进行了离体开花的诱导。1材料与方法1.1材料供试材料叠鞘石斛Dendrobiumdenndanum采于贵州省紫云县，并经贵州大学牛命科学学院植物学教硏室鉴定为叠鞘彳i斛。标本种植于贵州大学植物标本地。1・2材料处理与接种选取生长健壮、无病虫害感染的茎段，将其截成长1〜1.5cm的

6、带芽茎段，用流水冲洗1h，在超净工作台用75%的酒精消毒30s，再用0.1%的HgCl溶液消毒12min，无菌水冲洗5次。将此茎段接种于芽启动培养基上。每个配方接种10瓶，每瓶接种5段，22〜24°C，光照12h/d，光强度2000lx条件下培养。1.3培养基1.3.1芽启动培养基①MS+6-BAl.Omg-L-1+NAA0.5mg1+2%蔗糖+0.8%琼脂；②MS+6-BA1.Omg•L-1+NAA1.0mg•L-1+2%M糖+0.8%琼脂；③1/2MS+6-BA1.0mg-L-1+NAA0.5mg・L・1+2%蔗糖+0.8%琼脂；④1/2MS+6-BA1.0mg-L-1

7、+NAA1.0mgL1+2%蔗糖+0.8%琼脂。1.3.2芽增殖培养基①MS+NAA0.4mg-L-l+不同浓度6-BA（单位同前）+2%蔗糖+0.8%琼脂；②MS+NAA0.4mg-L-l+不同浓度KT（单位同前）+2%蔗糖+0.8%琼脂；③MS+NAA0.4mg-L-l+不同浓度ZT（单位同前）+2%蔗糖+0.8%琼脂。1.3.3生根培养基©MS+6-BA2.0mg-L-1+NAA0.4mg-L-1+2%^+0.8%琼脂；②MS+6-BA1.0mg-L-1+NAA0.4mg-L-1+2%蔗糖+0.8%琼脂；③M