经典酶法提取柑橘籽分离蛋白的工艺研究.pdf

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1、工上艺乙技仪术不经典酶法提取柑橘籽分离蛋白的工艺研究董元平(上海麦恺晨贸易有限公司上海201707)摘要：本研究为柑橘的深加工奠定理论基础，也提高柑橘的的利用率。在单因素实验的基础上，应用响应面法优化柑橘籽分离蛋白的提取条件，确定酶法提取蛋白的最佳工艺条件是：提取温度55℃、pH／di5．0、料液比1：8、酶；~&3ooou／ml、提取时间2h．，在此条件下提取率达78．16％。关键词：柑橘籽经典酶法分离蛋白提取工艺研究中图分类号：TS201．2文献标识码：A文章编号：1672．5336(2014)02—0025—031柑橘籽生产分离蛋白的优势籽8．9

2、6％都要高。由此可以看出柑橘籽的蛋白含量很(1)竞争性低，成本低。柑橘的价格低，虽然现在人们高，有较大的开发价值。(3)分离蛋白的发展前景广。对把柑橘籽添加到饲料中或者用柑橘籽浸出液处理过的分离蛋白进行改性制备出可生物降解材料[4】_【5】。现在白作物，防虫害。但现在少有关注于柑橘籽生产分离蛋白色垃圾污染严重，环保产品市场广阔。以及分离蛋白在从而获得更大的市场利益，因此竞争性低。(2)蛋白含量食品加工方面也有涉及，在高蛋白含量的食品或产品大更具优势。据国外文献[】]报道，柑橘籽中富含38．86％～中可以添加分离蛋白，提高蛋白的含量。42．59％油脂和2

3、8．56％～36．20％蛋白质以及其他矿物元2材料与仪器素。同时，比国内研究得比较多的甜瓜籽24．08％E、葡萄2．1实验材料80芝60蛋自蕊提墩率篓4o蛋白质提取率782。T6蜊74011．522．5时闻／h图1时间一蛋白质提取率的关系图图3pH值一蛋白质提取率的关系图8062差6o60篓40蛋白质提取率墓58置自赝提取率嚣2o怛皿56鹌04O455055温度／'C图2温度一蛋白质提取率的关系图图4料液化一蛋白质提取率的关系图表1正交实验因素水平设计水平A：温度，℃B：时间，hC：pH值D：料液比g／nilE：加酶量u／ml1551．541：620o

4、o26025l：830003652．27l：1050o0中外食品工业5Im—foreignFoodIndustry25工上艺乙技仪术小翡表2正交实验结果分离蛋白的提取：采用先用纤维素酶对物料在一定的序号ABCDE蛋白质提条件下进行反应，离心分离后，用NaOH母液进行pH调取率节，调PH值至9．2进行碱沉的方法，进行蛋白质的提11111172．02取。第五、柑橘籽分离蛋白的洗涤：蛋白沉淀物用蒸馏21l11273．653l11l372．76水洗涤3次至中性。第六、干燥：使用烘干箱进行干燥。41222175．2l(3)酶解液的配制：根据公式加入纤维素酶的剂量

5、51222277．1061222375．84溶于已知PH值的溶液中，制成酶解液，再根据条件进71333172．401．宰1，行酶解。m一纤维素酶的质量，g；X一所需8l333275．3791333374．92的加酶量，u／ml；y一溶液的体积ml；I40*IO’一纤维素102l23172．13酶的酶活力，u／g。112123273．52122123372．90第一、粗蛋白含量的测定：凯式定氮法测定粗蛋白l3223ll70。O6含量。第二、蛋白质提取率的测定：蛋白质提取率是在142231272．74获得使用试样的蛋白质含量的基础上，进行运算。即l5223

6、l372．05162312171．18浸提分离后残渣中的蛋白含量()：柑橘籽中蛋白含172312273．O2182312372．62量【6]0j提取莉％：l00一193132168．88203I32270．293实验结果213l32369．67223213270．443．1单因子实验结果233213272．013．1．1时间对蛋白质提取率的影响243213371．35时间是影响反应的一个因素。时间过短，酶反应不253321170．2626332l271．54完全，样品没有充分反应。因此，采用凯式定氮法测定27332l371．02蛋白质的含量低，物料的蛋

7、白质提取率也低。而时间k174．3671．7672．1271．7971．40过长，样品的蛋白质提取率相差很小，但实验的效率k272．2572．9873．2872．6573．25k370．6172．4871．8272．7872．57偏低。图l显示了时间对蛋白质提取率的影响。R3．761．221．46O．991．85在温度：45℃；料液比：l：10；酶活力：3000u／m1；ph：排秩143525的条件下，考察时间对蛋白质提取率的影响。水浴1h柑橘籽，来自汇源集团。后随着时间的增加，物料的蛋白质提取率也逐渐提高，2．2试剂水浴2h后，测得的样品蛋白质提取率

8、最大；水浴2．5h纤维素酶，五水硫酸铜，硫酸钾，硫酸，硼酸，盐酸，后，测得的蛋白质提取率与2h