蒺藜皂甙的提取及部分纯化研究.pdf

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1、第31卷第2期中州大学学报2014年4月Vol

2、3lNo．2JOURNALOFZHONGZHOUUNIVERSITYApr．2014蒺藜皂甙的提取及部分纯化研究宋彦显，闵玉涛(中州大学4EX-食品学院，郑州450044)摘要：对蒺藜皂甙的提取、索氏梯度分离和大孔树脂部分纯化进行了系统研究。结果表明，70％乙醇提取法优于水提醇沉法，得率为1．98％；经大孔树脂纯化，皂甙主要存在于40％，50％，55％，60％，65％乙醇洗脱液中，以40％乙醇洗脱液中皂甙含量最高；用薄层分析证实皂甙得到了纯化。关键词：蒺藜皂甙；提取；部分纯化中图分类号：TQ46l文

3、献标识码：A文章编号：1008—3715(2014)02一O1l7—04中药蒺藜，别名刺蒺藜、硬蒺藜、白蒺藜，有活血：10，w／V)回流提取3h，趁热过滤，真空浓缩，以蒸祛风、平肝解郁、明目、止痒等功效。_10蒺藜的主要馏水定容至50mL，搅拌下缓慢加人95％乙醇生理活性成分为皂甙，有明显的强壮及抗动脉硬化425ml，滤去沉淀，真空浓缩至近干，硅藻土转移，滤作用。苏联及保加利亚用其总皂甙制剂治疗动脉硬纸包裹，依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯索氏提取化及提高性功能；我国用其全草开发了相应制剂1h，再用正丁醇索氏提取3h。各提取组分分别浓“心脑舒通”，在

4、防治心脑血管疾病与性功能减退症缩，风干，称重，计算各部分收率。做定性试验。方面显示良好疗效。l3鉴于蒺藜皂甙在健身、抗疲1．2．1．270％乙醇回流提取法劳方面的突出作用，它有望成为功能因子研究领域取粉碎至40目的蒺藜40g，70％乙醇(固液比1中的一颗新星。本实验在前人工作的基础上对蒺藜：10，w／V)回流提取3h，趁热抽滤，滤液真空浓缩皂甙的提取、分离、部分纯化的工艺条件进行了系统至近干，浸膏硅藻土转移，滤纸包裹，依次用石油醚、研究，以期为医药和食品工业中新型功能因子的研乙醚、乙酸乙酯索氏提取1h，再用正丁醇索氏提取究与开发提供可靠的实验基础

5、。3h，各提取组分分别浓缩，风干，称重，计算各部分收1材料与方法率。做定性试验。1．1主要材料与仪器1．2．2大孔吸附树脂部分纯化蒺藜，购于郑州中药城，经专职药剂师鉴定；将未使用过的大孑L树脂用乙醇浸泡一天活化，LsA一20大孔树脂，西安电力树脂厂。装柱(柱内径2．6cm)，填料高度18．1em。用1％的SP一2102PC型紫外可见分光光度计，上海光谱NaOH约两个床体洗涤，然后用1％的HC1洗涤。蒸仪器有限公司；HH—S11—2型电热恒温水浴锅，北馏水冲洗至中性，待用。京长安科学仪器厂。洗脱所用水及乙醇液体积可按床体的倍数添1．2实验方法加，便

6、于计算所需洗脱液体积。1．2．1蒺藜皂甙的提取及分离正丁醇相浓缩至干，少量水溶，上柱，依次用蒸1．2．1．1水提醇沉法馏水和20％，30％，40％，50％，55％，60％，65％，取粉碎至40目的蒺藜40g，加蒸馏水(固液比175％，80％，95％乙醇梯度洗脱，收集各组分，进行泡收稿日期：2014—01—16作者简介：宋彦显(1979一)，女，河南南阳人，硕士，中州大学4E_z-食品学院讲师，研究方向：功能性食品。·l17·沫实验和颜色反应。将40％，50％，55％，60％，(3)糖类检测(13．一萘酚反应)65％乙醇洗脱液烘干称重。取样液约1m

7、L，加入一萘酚试剂3滴，混匀，1．3产物表征沿管壁慢慢加人浓硫酸约1mL，小心竖起试管，使硫1．3．1定性实验酸与样液清楚地分为两层。两液面间有紫色环，说1．3．1．1泡沫实验明样液中含糖。取样品水溶液2mL于小试管中，用力振摇1．3．2薄层层析1min，如产生多量泡沫，放置15rain后泡沫减少不明以硅胶制成的分析板为固定相，以展开剂作为显，则证明含皂甙。另各取样液lmL，一管加2mL展开体系进行薄层层析。用毛细管取样液点样，点0．1MNaOH溶液，另一管加2mL0．1MHC1溶液，用样原点距底边约0．8era，原点线距展开前沿线约为力振摇1r

8、ain，泡沫高度相近是三萜皂甙，加碱管明6era。在原点线上确定两个点为点样位置，边点样显高于加酸管的是甾体皂甙。边用吹风机吹溶剂，防止样点扩散。吹干后将硅胶1．3．1．2显色反应板置于已加入展开剂的层析缸中展开，待展开至前(1)醋酐一浓硫酸反应沿线取出，再次吹干后放入碘盒中碘熏显色，约2取少量皂甙样品溶解于醋酐中，加入醋酐一浓rain后取出，观察分离情况。硫酸试剂，能产生颜色变化，一般由黄色转为红色、1．3．3紫外可见分光光度法紫色、蓝色或绿色。如果是甾体皂甙，在颜色的变化1．3．3．1比色中最后呈现绿色，而三萜皂甙只能转变为红色、紫色0．00

9、45g皂甙溶于40mL80％甲醇液中(样品浓或蓝色，不出现绿色。度为0．112mg／mL)，分别移取0mL，0．4mL，0．8mL，(2