黄芪多糖通过激活线粒体凋亡途径诱导食管癌EC9706细胞的凋亡并增加其对顺铂的敏感性.pdf

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1、中华实验外科杂志2013年3月第30卷第3期Chin‘JExpSurg·539·March2013，V0l1_30，No．3,·实验研究·黄芪多糖通过激活线粒体凋亡途径诱导食管癌EC9706细胞的凋亡并增加其对顺铂的敏感性卢创新罗执芬周建炜崔勇霞周云【摘要】目的观察黄芪多糖、顺铂及黄芪多糖与顺铂联合对EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTF)比色法及流式细胞凋亡检测技术检测人食管癌EC9706细胞对黄芪多糖、顺铂及黄芪多糖联合顺铂的药物敏感性差异；应用免疫细胞化学技术检测细胞中B淋巴细胞／白血病一

2、2(bcl-2)、bc12相关x蛋白(bax)及核因子一KB(NF—KB)蛋白的表达。结果黄芪多糖和顺铂单药对食管癌EC9706细胞的增殖呈浓度依赖性的抑制作用，联合组诱导细胞凋亡率为41．3％，高于单药黄芪多糖组的18．7％及单药顺铂组的27．6％(P<0．05)；黄芪多糖能下调EC9706细胞中bcl一2、NF'KB蛋白的表达，灰度值分别为179．22-4-12．47、131．664-18．83，对照组灰度值分别为142．11±13．35、140．214-14．75，上调bax蛋白的表达，其灰度值为185．5

3、4±11．27，对照组灰度值为199．67±15．43。结论黄芪多糖通过激活线粒体凋亡途径来促进细胞凋亡，并通过抑制NF—KB的表达来促进EC9706细胞对顺铂的敏感性。【关键词】食管癌；黄芪多糖；顺铂；脱噬作用；耐药Mitochondrialapoptosispathwaycontributestopolysaccharideofastragalus-inducedapoptosisofEC9706cellsandenhancestheirsensitivtytocisplatinLUChuang—xin，LU

4、OZhi一尼n，ZHOUJian—wei，CUIYong—xia，ZHOUYun．DepartmentofOneology，People’sHospitalofZhengzho~University，Zhengzhou450003，ChinaCorrespondingauthor：YUNZhou，Email：syzlk2010@yahoo．corn．cn【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheantiproliferative，cytotoxic，apoptogenicactivit

5、iesofpoly—saccharideofastragalus(APS)anditssynergisticeffectswithcisplatinininducingapoptosisofesophagealcarcinomacells．MethodsMethylthiazoltetrazolium(MTI")assaywasusedtodetecttheantiproliferativeeffectofAPSandcisplatinonEC9706cells，AnnexinV—fluoresceineisot

6、hiocyanate(FITC)／propidiumio—dide(PI)stainedfluorescence—activatedcellsorter(FACS)wasusedtodetecttheapoptosisrate，andim—munocytochemistrywasusedtoexaminecellularlocalisationandBlymphocytes／leukemia一2(bcl一2)，bcl一2associatedXprotein(bax)，nuclearfactor-KB(NF—KB)

7、proteinlevels．ResultsAPSandcisplatinpro—duceddose—dependentinhibitionofEC9706cellgrowth．TheapoptosisrateinAPS+cisplatingroup(41．3％)washigherthaninAPSgroup(18．7％)orcisplatingroup(27．6％)．APScouldup—regulatethegreyvaluesofBaxprotein(185．54±l1．27)，anddown—reguate

8、thoseofbcl-2(179．22±12．47)andNF—KB(131．66±18．83)proteins．ThegreyValuesbcl-2，NF—KBandBaxincontrolgroupwere142．114-13．35，140．214-14．75and199．674-15．43，respectiely．ConclusionMitochondrialapo