高效液相色谱串联质谱法测定普洱茶茶籽油中的黄曲霉毒素B1.pdf

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1、第31卷．第5期光谱实验室V0I．31，No．52014年9月ChineseJournalofSpectroscopyLaboratorySeptember,2014高效液相色谱串联质谱法测定普洱茶茶籽油中的黄曲霉毒素B1伍旭东①罗发美车涛张林鸿(普洱市质量技术监督综合检测中心，云南普洱市北部区规划1号路与10号路交叉口东北侧665000)摘要建立了高效液相色谱串联质谱测定普洱茶茶籽油中黄曲霉毒素B1含量的方法。普洱茶籽油经乙腈一水(84：16，V／V)提取，经AflaStarR免疫亲和柱净化，选用cl。色谱柱分离，在电喷雾离子化正离子模

2、式(ESI)及多反应监测模式(MRM)下进行测定，基质匹配标准溶液外标法定量。黄曲霉毒素Bl取得很好的分离效果，在普洱茶籽油基质、3个添加水平(2、5、lOg，kg)的回收率范围为91．5％一-93．7％，相对标准偏差范围为4．1，-5．z％，以色谱信号3倍信噪比(S／N)确定方法检出限为0．04p．g／kg。基于以上结果，本文方法有效、耐用、灵敏，能够满足国家相关法规标准提出的油类样品中黄曲霉毒素Bl含量l0kg的要求。关键词高效液相色谱串联质谱；黄曲霉毒素B1；普洱茶茶籽油中图分类号：0657．7*2；0657．63文献标识码；B文章

3、编号：1004-8138(2014)05-610．071前言黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉等真菌代谢产生的一类有毒的真菌毒素n是一种毒性极强的剧毒物质，对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时可导致肝癌甚至死亡。黄曲霉毒素存在于牛奶、奶制品、食用油等制品中，目前发现黄曲霉毒素有2O多个种类，黄曲霉毒素B1又最为多见，其毒性和致癌性也最强，毒性大于氰化钾口，1993年黄曲霉素B1被世界卫生组织(wHo)的癌症研究机构划定为1类致癌物H，受到世界各国的广泛关注。欧盟在98／53／EC指令中规定了人类直接食用的花生中黄曲霉毒素的限量为黄曲霉B1小于

4、2~g／kg。中国对食品中黄曲霉毒素也制定了严格的限量规定哺。普洱茶茶籽油与茶同根同源，采用普洱茶树天然生长的普洱茶茶籽为原料加工而成。普洱茶茶籽油是唯一富含天然茶多酚的高端健康油，茶多酚具有抗氧化、防辐射，美容养颜，延缓衰老等功效。同时，普洱茶茶籽油除了与国外的橄榄油有极为接近的油脂成分配比外，还天然富含角鲨烯、胡萝卜素及维生素E等数十种营养物质，特别适合亚健康、孕妇、儿童、三高人群健康所需。一然而受网传”普洱茶中含黄曲霉毒素B1的不实言论影响，再加上近几年来在部分食用油的抽检过程中均有黄曲霉毒素检出，人们对普洱茶茶籽油的食用安全也产生

5、了质疑，因此，建立快①联系人．电话：(0879)2130908．Emaihjiangpulc@126．corn作者简介：伍旭东(1984一)。男，云南省普洱市人，助理工程师。硕士，主要从事食品检验工作．收稿日期：2014-05-26；=接受日期：2014-05-30第5期伍旭东等t高效液相色谱串联质谮法测定普洱茶茶籽油中的黄曲霉毒素B1611速准确的普洱茶茶籽油中黄曲霉毒素B1含量的检测方法极具重要意义，可对这类化合物的安全风险评价做技术支撑，为普洱绿色经济发展保驾护航。现阶段国家标准对黄曲霉毒素B1的检测方法主要有高效液相色谱法“’引、

6、荧光光度测定法哺、酶联免疫法，这些方法中高效液相色谱法虽然定量准确，但存在假阳性的问题，而且此方法需要柱后衍生，实验过程比较复杂；荧光光度法和酶联免疫法无论是定性还是定量都不能给出满意的结论，鉴于此，本试验以色谱作为分离系统，质谱为检测系统，将色谱对复杂样品的高分离能力，与质谱具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，准确的测定普洱茶茶籽油中黄曲霉毒素Bl的含量。本方法在2013年CNAS组织的植物油中黄曲霉毒素B1检测能力验证项目获满意结果(计划编号：PTC．T060，实验室代码：TO60．046)。2实验部

7、分2．1试剂与材料2．1．1试剂黄曲霉毒素B1标准溶液(美国RromerLabsbiopure公司)，浓度为2．01ttg／mL；乙腈、甲醇(美国J．T．Bake试剂公司)，HPLC级；吐温-20[梯希爱(上海)化成工业发展有限公司]；磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠乙酸铵、甲酸、氯化钾(天津市风船化学试剂科技有限公司)AR级，和吐温20配制成1％吐温20PBS缓冲液。2．1．2材料AflaStarR免疫亲和柱(美国RromerLabsbiopure公司)普洱茶茶籽油(普洱健源油脂有限公司)。2．2主要仪器设备．Agilent1200型高效

8、液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)；APD200型液质，质联用仪(美国应用生物系统公司)：Diret-Q5型超纯水机(法国Milipore公司)；AS3120A型超声清洗仪(天津奥特赛恩斯仪