发酵豆粕菌种的筛选-论文.pdf

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1、科学试验与研究发酵豆粕菌种的筛选王哲奇’安晓萍’齐景伟’陈大勇仝宝生1．内蒙古农业大学动物科学学院，呼和浩特0100182．内蒙古斯隆生物技术有限责任公司，呼和浩特011517摘要为得到多肽含量较高的发酵豆粕，以豆粕为底物，采用枯草芽孢杆菌1．0892、米曲霉2．0951、酿酒酵母2．119和植物乳酸杆菌P8进行单茵和混茵的发酵，发酵产物中多肽的含量为测定指标，筛选出合适的发酵菌种并确定其比例。结果表明：采用枯草芽孢杆菌1．0892和米曲霉2．0951混合发酵效果较好，接种比例定为2：1。关键词枯草芽孢杆菌1．0892米曲霉2．0951发酵豆粕大豆多肽中图分类

2、号：S816．6文献标志码：A文章编号：1002—2813(2013)11—0013—03中国作为世界上最大的养殖生产国之一，随着426、酵母菌HC及HC和乳酸菌HZ一134株菌种养殖业的快速发展，对饲料原料的需求也日趋增对豆粕进行发酵，通过优化发酵条件能使发酵豆粕加。近年来，随着动物营养研究的逐渐深入，对饲中的胰蛋白酶抑制因子完全分解。吴宝昌(2010)料的要求也日益严格，与以往相比，不单要求产量采用枯草芽孢杆菌1389与米曲霉3．042以1：1的体更注重质量，与此同时，资源的不断匮乏成为生产积比混合发酵制备豆粕饲料，优化发酵工艺后，发养殖的突出问题，尤其以

3、蛋白源的短缺最为严重，酵豆粕的蛋白酶酶活值约为980U／g，大豆肽转化蛋白质供需矛盾日益突出。豆粕是一种优质的植物率约为50％。刘建飞(2011)利用兼性厌氧的枯性蛋白饲料，蛋白含量在40％一50％。但是豆粕中草芽抱杆菌NCU646与酿酒酵母NCU223和植物乳的蛋白质分子结构比较复杂，并且约有80％的大豆酸杆菌NCU116固态发酵豆粕，产物中多肽含量能蛋白质相对分子质量超过100000，所以消化率和达到l7．01％。试验将枯草芽孢杆菌1．0892、米曲生物学效价较低，不及动物性蛋白质。此外，豆粕霉2．0951、酿酒酵母2．119和植物乳酸杆菌P8进中还存在一

4、些影响其饲用价值的抗营养因子，主要行单菌和混菌的发酵，以期得到合适的混合菌种，包括胰蛋白酶抑制因子、大豆凝集素、抗原蛋白、并确定混合的比例。脲酶和植酸等。这些因素都限制了其在饲料工业中1材料与方法的应用。微生物发酵法能够将豆粕中大分子蛋白水1．1材料解为小分子物质，并且能有效去除其中的抗营养因枯草芽孢杆菌1．0892、米曲霉2．0951和酿酒子。目前利用微生物发酵豆粕提高豆粕营养价值的酵母2．119购买于中国微生物菌种保藏中心。植物相关报道较多，朱曦等(2007)利用芽孢杆菌H一乳酸杆菌P8由内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室提供。豆粕为市购。收

5、稿日期：2013—05—241．2方法基金项目：“十二五”国家科技支撑计划项目(2011BAD1．2．1单菌发酵方法18B02)第一作者：王哲奇，E—mail：wzq．1988@126．corn将50g的豆粕装入250mL三角瓶中，高温高通信作者：齐景伟，副教授，E—mail：Qijingwei一66@126．corn压灭菌15min后作为发酵培养基。种子液培养到接饲料研究’i戢lt鞴A魏NO1120131科学试验与研究种时问后按干基10％接种量即5mL接种，先加到肽含量较高，但和84h的发酵结果相比差异并不显准备好的50mL无菌蒸馏水中，再倒入发酵培养基著，

6、所以也选择84h作为米曲霉2．0951单菌发酵中，用玻璃棒混合均匀后用发酵封口膜封口，放人的时间点。35℃的培养箱发酵，发酵的时间定为48、60、72、表1枯草芽孢杆菌1．0892发酵豆粕结果％84和96h，每时间点2个平行，发酵结束后放人发酵时间／h大豆多肽量488．27±0．38“65℃的烘箱中烘干，研磨过60目筛，放到干燥阴609．12±0．10凉处保存待测。7210．07±0．O91．2．2混菌发酵方法84l2．85±0．149613．09土0．29按比例将各种菌混合，按干基10％接种量接入注：同列数字肩标相同字母表示差异不显著(P>0．05)，肩标不

7、同发酵底物中，具体操作与单菌发酵相同。字母表示差异显著(尸<0．05)，下问。1．2．3多肽含量的测定表2米曲霉2．0951固态发酵豆粕结果％准确称取2．0g烘干研磨后的豆粕样品，加蒸馏发酵时间／h大豆多肽量水溶解并定容至50mL，移取10mL，加入等体积的486．95±0．226o8．18±0．16‘15％三氯乙酸溶液，静止5min后，4000r／rain离心72l0．76±0．3015min，取七清液，待测酸溶性蛋白和游离氨基酸8412．09±O．089612．54±0．06的含量。凯氏定氮法测定发酵产物中酸溶性蛋白的注I司表1。含量。茚三酮显色法测定发酵

8、产物中游离氨基酸的酿酒酵母2．119液