发酵豆制品中转基因成分的荧光定量PCR研究-论文.pdf

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1、j蚕c品研究与并j5《2013年7月检测分析FI《】OdResearchAndDeveloomen￡第34卷第13期79==-BOI：10．3969，j．issn．1005-6521．2013．13,022发酵豆制品中转基因成分的荧光定量PCR研究焦新萍，曾金红，郑云峰，江涛。李博斌，王路雯，诸葛庆，李岩冰，黄晓丽，曾红燕(绍兴市质量技术监督检测院，国家黄酒产品质量监督检验中心，浙江绍兴312071)摘要：以FAM和BHQ1两种荧光素分别标记为报告染料和淬灭染料，建立了转基因发酵豆制品中抗草甘膦转基因

2、EPSPS、大豆凝集素Lectin基因的Taqman荧光PCR定量检测体系，检测灵敏度为0．1％，重现性良好，特异性强，可作为发酵豆制品转基因成分定量检测的供选方法。在霉千张和臭腐乳(青方乳)等发酵豆制品中检出抗草甘膦转基因成分。关键词：发酵豆制品；转基因；荧光定量PCR；TaqMan~深针Detection0fGeneticallyModifiedIngredientinMildewQianZhangandSmellyBeanCurdbyFluorescentQuantitativePCRJIAOX

3、in-ping，ZENGJin-hong，ZHENGYun-feng，JIANGTao，LIBo一-bin，WANGLu-wen，ZHUGEQing，l_IYan-bing，HUANGXiao-li，ZENGHGng．一yan(ShaoxingTestingInstitutecf~ualityTechnicalSupervision，NationalCenterf(rQuaySupervisonandTestingofRiceWine，Shaoxing312071，Zhejiang，China)Abs

4、tract：WilhFAMandBHQ1twofluorescentlabeledreporterdyeandaquencherdye，thedetectionsystemwaseslablishedaboutEPSPS(5-enolpyruvylshimate-3-phosphatesynthasegen)andLectin(soybeankeepinggene)infermentedsoyproductsLyTaqmanfluorescentquantitatiVePCR，thesensitivi

5、tywas0．1％，andreproducibilityisgood．Becauseofitsgoodrepeatabihty，specificityandreliability，TaqManorobemethodisextremelyadequateforthequantitativedetectionofgeneticallymodifiedcomponentinfe~ertedsoy~rcducts．ThegeneticallymodifiedEPSPSwerefirstlydetectedin

6、mildewQianZhangandsmellybeancurdfermentedsoyproducts．Keywords：fe~．evtedsoyproducts；transgene；fluorescencequantitativePCR；TaqManprobe随着转基因食品的商品化生产，其安全性越来越技术的研究和调查工作显得极为必要。受到关注。目前全球已有65个国家和地区对转基因传统发酵豆制品包括腐乳、黄豆酱、豆鼓、酱油、产品实行强制性标识管理制度，少部分国家或地区实霉千张等，因其味道独特，滋味鲜

7、美，深受消费者的喜行自愿标识制度。澳大利亚、巴西、挪威、日本、韩国等爱。发酵豆制品不但风味独特，还具有许多特殊的营国家和地区的转基因产品标签制度，要求食品中转基养保健功能，如其抗氧化、降血压、溶血栓等。霉千因成分含量超过1％，2％或5％的必须实施标签，而张(霉千张筒)是利用毛霉等微生物发酵千张而制成欧盟的要求阈值更加严格，由原来的1％(1997年)提的豆制品，通常表面有一层白色的毛霉菌丝，因而得高到0．9％(2003年)【1_3J。越来越多的研究表明转基因名，其中以湖北和浙江较普遍生产。食品存在巨大的

8、健康隐患，然而，很多商家在利益抗草甘膦RoundupReady大豆含有外源花椰菜花驱动下对食品中转基因成分隐而不报，为维护消费者叶病毒CaMV35S启动子、抗草甘膦5一烯酮丙酮酸莽权益、保障消费者的知情权、食品中转基因成分检测草酸一3一磷酸酶基因(5一enolpyruvylshimate一3一-phos—基金项目：国家质检总局科技项El(2010QK3211phatesynthasegene，EPSPS基因)、胭脂碱合酶终止子作者简介：焦新萍(1980一