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1、第13卷第8期中国食品学报Vo1.13No.82013年8月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyAug.2013发酵方式与萃取条件对海南可可豆多酚含量的影响谷风林房一明徐飞初众卢少芳谭乐和(中国热带农业科学院香料饮料研究所海南万宁571533国家重要热带作物工程技术研究中心海南万宁571533农业部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室海南万宁571533)摘要采用液相色谱法测定木箱、竹盘、堆积、智能培养箱发酵方式下海南可可豆的多酚含
2、量;结合快速溶剂萃取仪,探讨浸提时间、浸提温度、溶剂浓度、料液比对多酚提取率的影响;通过正交试验确定可可豆中多酚类物质的最优萃取条件,并时不同提取条件下的可可多酚类化舍物进行定量分析。结果表明:4种发酵条件下,堆积发酵豆多酚含量最高,其次为木箱发酵豆,堆积(36.37mg/g)>智能培养箱(32.81mg/g)>木箱(31.86mg,g)>竹盘(29.61mg/g)。采用快速溶剂萃取仪提取后,9种可可多酚含量差异明显,均含有儿茶素、没食子酸、对香豆酸、表儿茶素,而阿魏酸均未检出。其中儿茶素含量最
3、多,其次为没食子酸和表儿茶素,对香豆酸含量最低。关键词高效液相色谱;快速溶剂萃取仪;海南可可;多酚文章编号1009—7848(2013)08—0268—06可可豆具有较高的营养价值,是饮料业和巧法检测单体多酚类物质已有很多报道.主要集中克力工业的主要原料Ill。其中富含的多酚.是可可于检测酚酸类与黄酮类物质方面It*-旧。豆中的天然成分,也是巧克力中对人体健康最有本文采用高效液相色谱法测定不同发酵方式益的成分,含量达到茶叶的4倍圆。多酚是赋予可下海南可可豆中多酚含量,并结合快速溶剂萃取可制品——
4、巧克力独特风味的成分,与其它食物仪与高效液相色谱比较不同提取条件下的可可多相比,可可豆中多酚的含量特别高【3】。多酚化合物酚,为海南可可豆的应用与推广提供科学依据。具有多种保健功能。如抗氧化性[41、抗癌作用[51、清除自由基,在药理上有延缓机体衰老、预防心血管1材料与方法疾病等效用嘲,被称为“第七类营养素”。目前关于1.1材料与仪器多酚的生物活性方面的研究已经十分广泛和深1.1.1实验材料海南可可鲜果、木箱、竹盘、香入,且它对人类健康方面的独特作用已经得到人蕉叶,由中国热带农业科学院香料饮料研
5、究所提们的普遍认可嗍。大量的文献资料证明可可豆有很供。无水乙醇、冰醋酸(分析纯试剂)、乙腈(HPLC高的保健功能与食用价值[9-12]。级),美国DMA公司;多酚标准样品:儿茶素、没食快速溶剂萃取方法是在一定的温度和压力子酸、对香豆酸、阿魏酸、表儿茶素,购于北京恒元下,用溶剂对固体或半固体样品进行萃取的方法,启天化工技术研究院。该法使用常规的溶剂,通过提高温度和增加压力1.1.2仪器与设备快速溶剂萃取仪(DIONEX,来提高萃取的效率,大大加快了萃取的时间,并明ASE150),美国;高效液相色谱
6、仪(HPLC1260),美显降低萃取溶剂的使用量[131。目前,高效液相色谱国安捷伦科技有限公司;快速水分测定仪(MJ33),瑞士METrLERTOLEDO;电子天平(ALl04),美收稿日期:2012—08—20国METrLERTOLEDO;全自动磨样机(RETSCH,基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项RS200),德国;干燥箱(DZF一6050),上海精宏;实(1630052012001)验室专用超纯水机(KL—RO一20),中国沃特尔;实作者简介:谷风林,男,1976年出生,
7、博士,副研究员验室智能培养箱(MJX一150),宁波海曙赛福;超速通讯作者:谭乐和冷冻离心机(Z36UK),德国Hermle。第13卷第8期发酵方式与萃取条件对海南可可豆多酚含量的影响1.2方法燥的可可豆粉碎并精细研磨,用快速水分测定仪1.2.1色谱条件色谱柱:C18(100mm~4.6mm,测定水分为3.95%。分别称取可可粉5.0.10.0.3.5m,Eclipseplus);检测温度:42oC;检测波15.0g各3份,置于快速溶剂萃取仪中,用43mL长:280rim;进样量:10L;流动相
8、为3%冰醋酸一无水乙醇溶液浸提,过滤萃取液。得可可多酚混合乙腈,V(3%冰醋酸溶液):(乙腈)=8:2,等度洗提取物。将提取物用流动相定容至100mL.经脱【垌。0.45m滤膜过滤,上机测定。1.2.2不同发酵条件可可样品的制备将可可鲜1.2.4对照品溶液的制备准确称取5种标准品豆分别放人木制箱子、竹制盘子、香蕉叶片和智能各10mg,用流动相分别定容至10mL,得1.0ms/培养箱中发酵,木箱四周及底部有小孔,盘子底部rIll多酚标准贮备液。准确移取各标液0.1,0.3,有小孔,便于通风,香蕉叶
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