[精品]有关酶的活性的思考题.doc

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1、1•酶活力测定实验的总体设计思路是什么？实验设计的关键你认为是什么？为什么？答：本实验的总体设计思路是在最适pH.温度等条件下测定a-及淀粉酶的作用产物一一麦芽糖的生成速度来表征酶的催化能力。首先应注意材料一一萌发种子的提取液中本身就会含有麦芽糖，这部分麦芽糖需用“对照管”来精确排除所有非指定测定时间段内的待测产物。同时如何使其中一种酶失活而不影响另一种酶的活性，来准确测定每种酶的活性,也是需要考虑的内容之一。2•本实验最易产生对结果有较大误差形响的操作是哪些步骤？为什么？怎样的操作策略可以尽量减少误差？答：向测定管对照管中加入淀粉和Na

2、OH要同时同步准确加入，防止因为反应时间不同造成对结果的彩响.3.a-淀粉酶活性测定时70C水浴为何要严格保温15分钟？保温后为何要立即于冰浴中骤冷？答：a-淀粉酶的耐热程度同样有限，15niin既保证了0-淀粉酶最大程度钝化，有保证了a-淀粉酶活性不受损伤；立即冷却是阻止0-淀粉酶的复性。4.pH5.6柠檬酸缓冲液的作用？各管于40C水浴准确保温15分钟的作用？答：pH5・6是本实验条件下酶的最适pH环境；反应开始前准确保温15tniii是保证达到反应最适温度而又不会因时间过长而使酶失活°5.众多测定淀粉酶活力的实验设计中一般均采取钝化

3、P-淀粉酶的活力而测a-淀粉酶和测总酶活力的策略，为何不采取钝化a-淀粉酶活力去测0-淀粉酶活力呢？这种设计思路说明什么？答：热钝化”淀粉酶是体系外加热然后骤冷，继续a-淀粉酶的测定。而不耐酸的a-淀粉酶的钝化必须在体系内进行，后续测定如调节pH至5・6,a-淀粉酶将会复性，不调节pH值，廿淀粉酶的测定又缺乏严谨性，所以虽然理论上可行，但实际中操作性很差；这种设计思路说明了理论上的可行性与实际中的可操作性之前是需要权衡的，只有可操作性强，所得实验结果可信度才越高.6•本实验中所设置的对照管的作用？它与比色法测定物质含量实验中设置的空白管有

4、何异同？本实验可否用对照管调分光光度计的100%T?为什么？答：对照管所要刨除的是非测定时间段内所产生的作用产物，而比色中的空白管所刨除的是非测定物质在特定波长下的光吸收。设计理念都是刨除非测定目标的影响，只是各自刨除的对象不剛不能，由于本实验对照管中含有麦芽糖，所以相关反应后同样会产生在A520下有特异光吸收的物质，所以不能用来做空白管调100%T.7.我们所测定得到的总酶活力减去所测定得到的a-淀粉酶活力是否就等于0-淀粉酶活力？为什么？你的结论说明什么？答：不等于，口-及。-淀粉酶的作用位点不用，活力不是简单的加和，在生命活动中，a

5、-和淀粉酶会产生酶的协同作用，协同作用所产生的活力，远远大于二者单独作用的活力之和.说明生命活动有其本身的协调性和完整性，破坏其中的协同配合，会大大降低生物反应的效率，生命活动完美而神奇，不能用简单的单一目光看待问题，同时还要注意到个体之间的内在联系。