羊肉产品中若干动物源性成分的七重pcr检测技术应用研究

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1、中国畜牧兽医2010年第37卷第9期生物技术·85·羊肉产品中若干动物源性成分的七重PCR检测技术应用研究冯海永。，韩建林2(1．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部家养动物遗传资源与种质创新重点开放实验室，北京100193；2．中国农业科学院一国际家畜研究所畜禽牧草遗传资源联合实验室，中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京100193)摘要：试验建立了猪、牛、绵羊、山羊、鸡、马和牦牛种属鉴别的七重PCR体系，分析了牛、牦牛、山羊源性成分七重PCR检测的灵敏度，检测了10种市售羊肉产品中的动物源性成分。结果表明，采用常规的琼脂糖凝胶电泳可以区分157～517bp的片段及相互差异在4

2、1bp以上的多重PCR扩增产物，从而实现对这7个物种的快速及准确鉴别，其中对3个物种(牛、牦牛、山羊)DNA的检测灵敏度在2．5ng左右；所检测的1O种羊肉产品中有2种并不是包装上所宣称的羊肉，而是混杂有牛肉或完全用牛肉替代。关键词：七重PCR；羊肉产品；动物源性成分；种属鉴别中图分类号：$851文献标识码：A文章编号：16717236(2O10)090085-06羊肉中脂肪少，蛋白质丰富，含有较高的钙、钾和VB等，胆固醇含量较低。然而近年来以其它物种肉掺入羊肉产品中进行销售的事件却屡有发生，收稿日期：201O0319这种掺杂其它动物成分的不法行为不仅给消费者带作者简介：冯海永(19

3、78一)，男，河北人，硕士生，研究方向：畜产来损失，也给羊肉产业的健康发展造成不良影响。品的分子追溯。通信作者：韩建林(】963一)，男，甘肃人，研究员，研究方向：动物因此，建立快速、准确的检测方法，为加大对此违法遗传资源的评定、保护及利用。Email：hanil@ias行为的打击力度提供技术支撑，已经成为摆在科研cass．net．cn工作者面前的重大课题。采用感官或免疫检验等可基金项目：“十一五”国家科技支撑计划项目(2007BAD52B05)；CAAIIRI联合研究项目(2008C103)；中国农业科以鉴别生鲜肉的种属类别，但对深加工处理后的肉学院一级岗位杰出人才基金项目。类及其

4、产品，由于其感官性状、蛋白质成分和其他免⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯一⋯macaques[J]．Vaccine，2000，18(21)：2250～2256．poxvirusFP9andmodifiedvacciniavirusankaraencodingthe26SunYK，WangYF，ZhiHI)，eta1．Constructionandcharacter—fulllengthPlasmodiumfalciparumcircumsporozoiteproteinizationofarecombinantfowlpoxvirusexpressing

5、chickentypeEJ]．InfectImmun，2006，74(5)：2706～2716．IIinterferon[J]．ChineseJournalofAgriculturalBiotechnolo28ZhangHY，eta1．ConstructionandimmunogenicityofarecombigY，2005，2(2)：7097～7111．nantfowlpoxviruscontainingthecapsidand3Cproteasecoding27WaltherM，FionaMT，SusannaD，eta1．Safety，immunogeniciregionsof

6、foot—and—mouthdiseasevirus[J]．JournalofVirologi—ty，andefficacyofprimeboostimmunizationwithrecombinantcalMethods，2006，136(1～2)：230～237．FowlpoxVirusVectoranditsApplicationSUNPeng，WANGYun—feng。HUGui—xue(1．CollegeofAnimalScienceandTechnology，JilinAgriculturalUniversity，Changchun130l18，China；2．Harbi

7、nVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Harbin150001，China)Abstract：F、PVvectorhasbeenreceivedmoreandmoreattentionsfromscholarsinrecentyears．ThetheoremoftheFPVvectoristhattheheterologousgeneisinsertedintot