天然植物制剂“开口健”对小鼠淋巴细胞功能及营养生长因子的影响

《天然植物制剂“开口健”对小鼠淋巴细胞功能及营养生长因子的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、’璃2010年第5期天然植物制剂“开口健"对小鼠淋巴细胞功能及营养生长因子的影响吴强，昊德峰陈佳铭赵瑾胡松华(1．福建农林大学食品科学学院，福建福州350000；2．福建农林大学动物科学学院；3上海朝翔生物技术有限公司；4．浙江大学动物科学学院)摘要：目的：探讨口服“开口健”对小鼠淋巴细胞功能以及营养生长因子的影响。方法：36只ICR小鼠随机分为4组，即生理盐水组，“开口健”低、中、高剂量组。给小鼠连续灌胃10d后，用MTT法检测淋巴细胞刺激指数，RT—PCR方法检测ConA刺激后淋巴细胞产生的IL一4、IL一10、IL一12和INF一^ymRNA水平，ELISA方法检测

2、小鼠血清胰岛素样生长因子(IGF一1)和生长激素释放~k(Ghrehn)水平。结果：口服“开口健”小鼠脾脏淋巴细胞sI显著高于对照组(P<0．01)，并随“开口健”剂量的增加而升高；口服“开口健”小鼠脾脏淋巴细胞产生IL一4、IL一10、IL-12和IFN一．ymRNA水平显著高于对照组(P<0．05)。口服“开口健”显著提高了小鼠血清的IGF一1和Ghrelin水平(l<()05)，且与“开口健”剂量呈正相关性。结论：口服“开口健”可增强小鼠淋巴细胞功能并提高血清营养生长因子水平。关键词：开口健；胰岛素样生长因子一1；生长激素释放肽；淋巴细胞刺激指数中图分类号：$853

3、．74文献标识码：A文章编号：1000—6354(2010)05—0016—04I开口健”是利用国内多种天然植物，通过现代制作E艺验动物设备有限公司)；ABIAppliedBiosystem7300荧光PCR调提取、浓缩、分流、干燥、复配而成，富含多种天然植物多糖、仪(美国ABI公司)。查黄酮成分，以及多种植物氨基酸和矿物质，具有促进机体免1．1．2试验动物清洁级雄性ICR小鼠(20±2)g，购自上海研疫功能的作用。研究表明，胰岛素样生长因子一1(IGF一1)能斯莱克实验动物责任有限公司，饲养于IVC独立送风饲养笼究促进细胞分化和增殖，具有胰岛素样代谢效应等多种生理功具中

4、，室内温度(24±1)℃，湿度(50±10)％。动物饲养一周能I．．I。给正常成年鼠注射IGF一1可明显增强其免疫功能。后，开始试验。生长激素释放肽(Ghrelin)在动物体内具有刺激食欲、促进生1．1．3“开口健”由朝翔生物技术有限公司提供，每次灌胃长、促进生长激素释放、提高免疫水平、延缓衰老等I】多方面前用生理盐水配制成所需浓度。功能。笔者等前期的研究表明，给小鼠口服“开口健”可以提1．1．4RT—PCR所需试剂及引物、探针Trizol试剂盒、Oligo高小鼠单核巨噬细胞碳廓清能力和促进抗体产生，为进一步(dT)Sprimer、5XReactionBufer、dNTP

5、、Transcriptase(M-MLV)、评价“开口健”的免疫调节作用及作用机理，笔者等测定了口TaqDNA聚合酶均购自上海生物工程技术服务有限公司。根服“开口健”小鼠淋巴细胞的增殖能力和脾脏淋巴细胞产生据基因库(GenBank)上发表的小鼠IL一4、IL一10、IL一12、IFN一^，的IL一4、IL一1O、IL一12和INF一mRNA水平，以及小鼠血清和B—actin的RNA序列，用PrmierPrmier5．0软件设计引物，中的胰岛素样生长冈子一1和生长激素释放肽水平。由上海生物工程技术服务有限公司合成。引物和探针的序列1材料与方法见表11．1材料1．1．1主要仪

6、器DZ60型电热恒温真空干燥箱(上海医疗表l用于RT—PCR方法检测细胞因子引物和探针序列器械七厂)；MP500B型电子天平(上海天普分析仪器有限公司)；LS—B50L型立式压力蒸气灭菌器(上海华线医用核子仪B—aetinforward：5’一AGCGGTYCCGATGCCCT一3‘reverse：5’一AGAGGTCTrrACGGATCTCAACC一3‘器有限公司)；5810R型台式大容量高速冷冻离心机probe．：5’HEX-TCCTI'CTI'GGGTATGGAATCCTGTGGC—BHQ—t3(Eppendof公司)；HT一2型酶标仪(TecanAustriaGm

7、bH)；IL—4forward：5’一GAGAMM一1型微量振荡器(中国姜晏康泰医疗器材厂)；YS一2型显mrse：5’一CAGGAAGTC1rrrCAGTGATGTGG一3‘微镜(Nikon)；手动计数器(绍兴县医疗器械厂)；超净工作台probe：5’FAM-CCTGGATYCATCGATAAGCTGCACC—BHQ一13‘(苏净集团安泰公司)；Galaxy系列C02培养箱(Eppendof公IL一10forward：5’一CCAGTITrACCTGGTAGAAGTGAFG一3‘reverse：5’一CTrGCTCTTATr