猪繁殖与呼吸综合征病毒wf-1株的分离鉴定及nsp2和orf5基因的变异分析

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1、西南农业学报2010年23卷4期1264SouthwestChinaJournalofAgrieulturalSciencesV01．23No．4文章编号：1001—4829(2010)04—1264—07猪繁殖与呼吸综合征病毒WF．1株的分离鉴定及NSP2和ORF5基因的变异分析李坤，吴家强，张金强。，李俊，于江，刘洋，张玉玉，刘少宁’，王兆，周顺，王金宝，。(1．青岛农业大学动物科技学院，山东青岛266109；2．山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东济南250100；3．山东农业大学动物科技学院，山东泰安271000)摘要：从山

2、东某大型猪场患“猪高热病”的病料中分离到1株病毒，该病毒可在Mare·145细胞上增殖，产生细胞病变。经RT-PCR鉴定证明，该病毒为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)，将其命名为wF—l株。用RT·PCR法分别扩增该分商株的NSP2基园和ORF5基因，并进行核苷酸序列测定和分析。结果表明，PRRSVWF．1株的Ⅳ5

3、口2发生30个氨基酸的不连续缺失，缺失位置与PRRSV参考变异株J)(A1相同；ORF5基因与JXA1、CH—la、V1D332核苷酸同源性分别为98．0％、94．2％、86．4％，氨基酸同源性分别为97．5％

4、、94．0％、87．5％。基因遗传进化树分析结果显示，wF·l栋与2006~2008年期问分离的JXA1、SX一1等高致病性变异株的亲缘关系很近，与1996年分离的中等毒力毒株CH·1a亲缘关系较远，与VR2332、CC一1、MLV等弱毒株或疫苗株处于不同的分支。关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒；分离；NSP2基因；ORF5基因；变异分析中图分类号：s828文献标识码：AIsolationandSequenceAnalysisofNSP2GeneandORF5GeneofPorcineReproductiveandRespirator

5、ySyndromeVirus聊’-IStrainUKun，WUJia-qiang2ZHANGJin·qiang’，LIJun，YUJiang，LIUYang’，ZHANGYu·yu．。LIUShan—ning3，WANGZhao‘，ZHOUShun¨．WANGJin—bao‘(1．CoUegeofAnimalScienceandTechnology，QingdaoASaculturalUniversity，ShandongQingdao266109，China；2．InstituteofAnimalScienceandVeterin

6、aryMedicine，ShandongAcademyofA鲥culturalSciences，ShandongJinan250100，China；3．CollegeofAnimalSci—enceandTechnology．ShandongAgriculturalUniversity，ShandongTai’al271000，China)Abstract：Astrainofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus(PRRSV)wasisolatedfromapigherdwith

7、hishfeversyndromeinShandonganditw衄designateda3WF—lstrain．TheS尸2geneandD昆FgeneofWF一1strainwe／'~amplifiedbyRT—PCRandsequencedthereafter．TheresultsshowedthatWF．Istrainwa8classifiedintotheNorthAmericangenotypeandithaddiscontinuous30aminoacidsdele—tionsinNSP2．TheORF5geneofW

8、F．1strainshared97．5％，94．0％and87．5％innucleofidelevel，and97．5％，94．0％，87．5％inaminoacidlevel，withthoseofJXA1。CH一1aandVR2332，respectively．PhylogenetietreeanalysisrevealedthatWF-1hadcloserrcla-tionshipwithJXAlandSX-1strainsthanclassicalstrains，suchasCH·la，HNI，VR2332，CC—1．Key

9、words：PRRSV；Isolation；

10、p2gene；ORF5gene；Sequenceanalysis；Geneticvariation猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼北卡罗纳、衣阿华等州的猪群中暴发，迅速在全球蔓