比较不同诱导体系体外诱导华通胶间充质干细胞分化为内皮细胞的研究

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1、·324·《转化医学杂志}2013年12月第2卷第6期TranslationalMedicineJournal，VoI．2No．6，Dee2013·干细胞与转化·比较不同诱导体系体外诱导华通胶间充质干细胞分化为内皮细胞的研究曹芳英，张宁坤，高连如，朱智明[摘要]目的比较诱导因子和非接触共同培养2种方法诱导人脐带华通胶间充质干细胞(humanam—bilicalcordWha~onsjelly—mesenchymalstem(：ells，HUW—MSCs)分化为内皮细胞的优劣。方法剖宫产取脐带用酶消化和组织块贴壁2种方法

2、获得HUW—MSCs。实验分诱导因子组、共同培养组和单纯培养组。诱导因子组用血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子联合诱导培养；共同培养组HUW—MSCs与人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells，HUVECs)非接触共同培养；单纯培养组只加培养液培养。培养周期为14d。第7天检测CD309，第10天进行Dil标记乙酰化低密度脂蛋白(Dil—labeledacetylatedlowdensitylipoprotein，Dil—Ac—LDL)吞噬实验；第1

3、4天检测CD31、血管假性血友病因子(yonWille—brandfactor，vwF)、内皮素一1(endothelin一1，ET一1)和一氧化氮(nitricoxide，NO)。结果各组细胞形态较实验前有显著变化，但均未见典型铺路石样改变。3组细胞表达CD309上调；诱导因子组和单纯培养组表达CD31下降，而共同培养组CD31明显上调。NO及ET一1含量检测均较HUVECs低，但差异无统计学意义(P>0．05)，3组之间比较差异同样无统计学意义(P>0．05)。vWF及Dil—Ac—LDL各组反应呈弱阳性。结论HU

4、W—MSCs在诱导因子和内皮细胞旁分泌作用下均具有向内皮细胞分化倾向，使用诱导因子较非接触共同培养方法诱导HUW—MSCs向内皮分化的效果更好。[关键词]脐带华通胶；问充质干细胞；血管内皮细胞；生长因子；非接触共培养[中图分类号]R329．24；Q254[文献标志码]A[文章编号]2095—3097(2013)06-0324-05doi：10．3969／j．issn．2095—3097．2013．06．003Studyofumbilicalcord-derivedhumanmesenchymalstemcellsdif

5、erentiationintoendothdialcellsindiferentinductionconditionsinvitroCAOFang—ying一，ZHANGNing—kun，0Lian—ru，ZHUZhi—ming(1．DepartmentofReseach，SouthernMedicalUniversity，GuangzhouGuangdong510515，China；2．HeaaCenter，NavyGeneralHospital，Beijing100048，China)lAbstractJobjec

6、tiveTostudythedifferenceofumbilicalcord—derivedhumanumbilicalcordWhartonsmesenchymalstemcells(HUW—MSCs)differentiationintoendothelialcellsbetweenmethodsbyinducingfactorsandnon—contactco—culture．MethodsTheumbilicalcordswereob—tainedfromcesareansection．Weisolatedt

7、heWhartonsjellyandobtainedhumanumbilicalveinsendothelialcells(HUVECs)．HUW—MSCsweredividedinto3subgroups，factorsgroup，cocuhuregroupandhaplo—cultivationgroup．Theculturemediaofinductionsubgroupcontainedvascularen—dothelialgrowthfactor(VEGF)，basicfibroblastgrowthfac

8、tor(bFGF)andepidermalgrowthfactor(EGF)．MSCswerefirstcocuhuredwithHUVECsinnon—contactsystem．Mediaforhaplo—cultiva—tionwasjnstMI99．AlloftheM199contained10％FBSand1％mycil