重金属离子对轮藻叶绿素含量和细胞膜透性的影响

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时间:2017-12-08

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1、四川大学学报(自然科学版)第J8卷文章编号:!"#!$%&’(%(!!))!’$!&’&$!&重金属离子对轮藻叶绿素含量和细胞膜透性的影响傅华龙,陈浩!,董斌,卿人韦!!(四川大学生物系,成都%)!!%")摘要:根据)%*’正交设计原理,在实验室人工培养条件下,研究了不同浓度水平的+,%-,+.(-,/0(-和"12(-对普生轮藻叶绿素的含量和细胞膜透性的影响3其总的趋势是随着重金属离子浓度的升高,藻体内叶绿素的含量和细胞膜透性减小3对其叶绿素含量影响的强弱顺序依次是+,%-,+.(-,/0(-和12(-,对细胞膜透性的影响强弱顺序依次是:+

2、.(-,+,%-,/0(-和12(-3关键词:轮藻;重金属毒理;细胞膜透性中图分类号:4)&文献标识码:5国内外学者普遍认为轮藻是研究植物的分类学、细胞学、遗传学和生物化学方面的一种理想实验材料,而且已做了大量的工作[)]3但是,就环境中有毒重金属离子对轮藻毒理影响等方面的研究,至今尚未见报道3沉水低等植物普生轮藻(!"#$#%&’(#$)**3),对水体中的各种刺激有较高的敏感性[(],且易于培养并分布广泛3我们在实验室内用镉、汞、铅和铬"种重金属离子的不同浓度组合,模拟污水环境培养轮藻,研究了轮藻叶绿素#,+总含量和细胞膜透性的变化,为重

3、金属对植物的毒理研究提供一定的实验数据3)材料与方法)3)材料)3)3)供试轮藻普生轮藻(!"#$#%&’(#$)**3),采于四川省双流县棠湖公园3)3)3(仪器/675+/6)8!$8!,19:;,<=>.=>>?;@5A9?BA,9DF9A9?>A>,,G*5$6型石墨炉(H;D;@),IHE$))5型电导仪,&()分光光度计,恒温水浴锅,分析天平,)!*反边玻璃水槽3)3(方法)3(3)轮藻预培养为了避免因泥土吸咐重金属离子而造成的误差,我们采用无土水培法培养,经(!.培养试验后,证明普生轮藻能在无土自来

4、水中正常生长3)3(3(实验方案设计采用"因子正交实验,具体方案见表)和表(,"种重金属离子类别及浓度水平的设计参考文[J]进行3其中第)&组和第)8组为对照组,在第)&组中无重金属离子但接种了轮藻;在第)8组中添加了重金属离子但不接种轮藻,其浓度水平依次为:+,%-(-(-)3!!?0K*,+.(3!!?0K*,/0)3%!?0K*和(-12)3!!?0K*,都高于以上各实验组3培养器皿为)!*反边水槽,接种量为用自来水洗净的新鲜轮藻(!!03然后将)8个反边水槽分别放在固定的木架上,自然光照3表)"种重金属离子及其浓度(?0K*)因素,+

5、.(-:+(.LM),):!-!(,(:!-!J,J:!-!",":!-!8J(因素./0(-:/(0LM).):!-!&.(:!-!8.J:!-)!.":!-%!J(因素!12(-:1(2LM)!):!-!’!(:!-!&!J:!-!8!":!-)!J(因素/-+,%-:N+,M/):!-!#/(:!-!’/J:)-!!/":(-!!((&收稿日期:(!!)$!%$!%基金项目:国家自然科学基金!现在四川省原子核应用技术研究所工作;!!通讯作者万方数据第&期傅华龙等:重金属离子对轮藻叶绿素含量和细胞膜透性的影响’&*表!正交组合实验组编号组

6、合实验组编号组合(")!"""#"$"("#)!$"!#%$$(!)!""!#!$!("")!$"$#"$!($)!""$#$$$("!)!$"%#!$"(%)!""%#%$%("$)!%""#%$!(&)!!""#!$$("%)!%"!#$$"(’)!!"!#"$%("&)!%"$#!$%(()!!"$#%$"("’)!!"!#"$$())!!"%#$$!("()对照组"(*)!$""#$$%("))对照组![%]间隔",测定"次+取培养中的藻体,用吸水纸吸干外部的水"+!+$分析测定(")细胞膜透性的测定分,称取&-,用自来水洗净后,再用

7、去离子水洗%次,放入%#./烧杯中,将上述藻体剪碎并加入去离子水至[&]间隔",%#./,不时振荡,!0$1后,用2345""6型电导仪测定浸出液的电导率(+!)叶绿素%,&的测定测定"次7!+取出轮藻藻体,用吸水纸吸去外部水分后,用分析天平称取"-,用自来水洗净,再用吸水纸吸干外部水分,放入研钵中加入)#8丙酮"#./,将藻体磨成匀浆,小心将绿色液体经漏斗过滤+将滤液倒入"##./容量瓶中+滤渣用!#./)#8丙酮溶液重复研磨匀浆,过滤,如匀浆仍带绿色,则再加"#./的丙酮研磨,如此进行,直至滤液无色为止,收集各次滤液并用)#8丙酮定容至"

8、##./+"+将叶绿素提取液倒入"#./比色杯中,以)#8的丙酮为空白对照,用分光光度计分别在波长’%&9.,’’$9.和’&!9.处测量并记录其光密度值($)和透

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