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1、第35卷第4期通化师范学院学报(自然科学)V01.35No42014年8月JOURNALOFTONGHUANORMALUNIVERSITYAug.2014超声波辅助提取大叶子总黄酮工艺研究李明,金刚,朱俊义。,徐晶(1.通化师范学院制药与食品科学学院,占林通化134002;2.修正药业集团股份有限公司3.通化师范学院生命科学学院,吉林通化134002)大叶子(Astilboidestabularis)别名大脖梗子、山醇超声提取一乙醇回流提取一过滤一一十测定总黄酮含荷叶,多年生草本,分布于吉林长白山和辽宁,生于量.准确称取处理好的原料粉末2g于烧瓶中,加人
2、海拔1000m左右的林下.朝鲜半岛也有分布.大叶浓度50%的乙醇溶液95mL,在500W、40KHz条件子可食,民间常作为山野菜食用,且有收涩、固肠、止下超声提取5min后,在80%水浴中加热回流30rain泻的功效.中药化学成分为无色飞燕草素、无色矢车后抽滤,定容至lO0mL.菊素、槲皮素、没食子酸⋯.大叶子是一种极具开发(3)总黄酮含量测定J.精密吸取0.1mg/mL潜力的药食两用植物.迄今为止,国内对大叶子的研的芦丁对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL,究还未见报道.本文主要研究大叶子总黄酮提取的分别置于10mL容量瓶中,加
3、30%乙醇使成5mL.先最佳工艺,以期为大叶子在保健食品开发方面的研加5%的NaNO,溶液0.3mL,混匀后放置6min;再究提供依据.加10%的AI(NO)溶液0.3mL,摇匀后放置1材料与方法6rain;最后加4%的NaOH溶液4mL,用蒸馏水稀释I.1材料和仪器到10mL,摇匀,放置15min,以第一管为空白,在大叶子,采集自吉林长白县,经通化师范学院于510nm波长处测定吸光度值,以吸光度值为横坐标,俊林教授鉴定为大叶子;芦丁标准品,中国固体制剂芦丁对照品溶液浓度为纵坐标,绘制标准曲线.从制造技术国家工程中心.亚硝酸钠、氢氧化钠、硝酸100mL提
4、取液中精密吸取lmL该溶液置于lOmL容铝、乙醇等试剂均为分析纯.天平、真空干燥箱、粉碎量瓶中,加30%乙醇使成5mL,以下步骤同标准曲机、水浴锅、循环水式真空泵、可见分光光度计、超声线制作测定提取液中总黄酮含量.波清洗仪.(4)超声提取单因素试验设计.准确称取处理1.2方法好的原料粉末各2g于烧瓶中,加入浓度为50%的(1)原料处理.工艺流程:原料选取一清洗一一烘乙醇溶液95mL,在500W、40KHz条件下超声提取干一粉碎.选取大叶子鲜品,清洗后在真空干燥箱中5、10、15、20、30、35min后,在80℃水浴中加热回流烘干,粉碎.30min后抽滤
5、,定容至100mL.(2)总黄酮提取.工艺流程:大叶子干粉一加乙(5)总黄酮回流提取单因素试验设计.①乙醇}收稿日期:2014—04—24作者简介:李明(1979一),吉林通化人,硕士,实验师基金项目:通化师范学院校级项目(200951).·l2·浓度对得率影响.准确称取处理好的原料粉末各2g于烧瓶中,分别加入浓度为10、30、5O、70、90%的乙醇溶液各80mL,在80℃水浴中加热回流30min后抽滤,定容至lOOmL.②提取温度对得率影响.准确称取处理好的原料粉末各2g于烧瓶中,加入浓度为50%的乙醇溶液80mL,分别在50、60、7O、80、9O
6、cI=0bl6z4C_时啊(1~al水浴中加热回流30min后抽滤,定容至lOOmL.③料图2超声时间对得率影响液比对得率影响.准确称取处理好的原料粉末各2g2.3回流提取单因素试验结果与分析于烧瓶中,分别用50%的乙醇以物料比为1:20、(1)乙醇浓度对得率影响.由图3可知,乙醇浓l:30、l:40、1:50、1:60混合,在8O℃水浴中加热回流度在50%时,总黄酮得率最高,故选择50%乙醇提30rain后抽滤,定容至lOOmL.④提取时间对得率影取较合适.响.准确称取处理好的原料粉末各2g于烧瓶中,加入浓度为50%的乙醇溶液8OraL,在80℃水浴中
7、加热回流2O、4O、60、80、lOOmin后抽滤,定容至100mL.⑤总黄酮提取正交试验设计.以单因素试验为基础,选取乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间四项作为考察因素,各取三个水平,进行L9(3)正息量麓搏翠t298765t32l●交试验设计,以确定大叶子提取的最佳工艺条件,方0即4口叫Ul叫乙—鞲度(1'案见表1.图3乙醇浓度对得率影响表1正交试验因素水平(2)提取温度对得率影响.由图4可知,随温度的升高,得率也在升高,90qC得率最高,但从80~(3开始曲线趋于平缓,从能源角度考虑选择90qC较合适.2结果与分析Tj,’‘:{l:2.1芦丁标准
8、品溶液的标准曲线l一’’、一~一。一一’~⋯5O8708O90:00采用二元线性
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