应用人巨细胞病毒-核酸扩增反应对复方黄芪颗粒治疗感染人巨细胞病毒小鼠的疗效评价【.doc

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1、药学论文-应用人巨细胞病毒-核酸扩增反应对复方黄英颗粒治疗感染人巨细胞病毒小鼠的疗效评价【关键词】应用摘要：冃的应用人巨细胞病毒•核酸扩增（HCMVPCR）反应探讨中药复方黄罠颗粒对感染HCMV小鼠治疗作用。方法用小鼠尾静脉染毒法建立HCMV全身获得性感染模型，并用复方黄董颗粒给小鼠灌胃治疗，然后应用HCMVPCR反应测定其内脏HCMVDNA阳性率。结果复方黄英颗粒42.0»21.Og/kg组HCMVDNA阳性率明显低于模型组（P<0.05）。结论复方黄董颗粒对感染HCMV小鼠有一定的治疗作用。关键词：人巨细胞病毒■核酸扩增（HCM

2、VPCR）；复方黄英颗粒；人巨细胞病毒；人巨细胞病毒感染小、鼠模型EvaluationofCurativeEffectofRadixAstragaliGrainSmal1RatoutreatingHumanCytomegalovirusInfectioninMicebytheHCMV・PCRRespondAbstract：ObjeeliveTostudythecurativeeffectofradixastragaligrainofChineseherbalmedicinecompoundprescribeonrightinfect

3、ionHCMVbyHCMVPCRrespond.MethodsDyethepoisonmethodtoestablishtheHCMVwho1ebodytoacquirewithveinofmicetailsexydyethemodel,andcounteracttheradixastragaligrainofcompoundprescribetothemicerespectivelythetreatment,thenapplytheHCMVPCRtorespondtomcasuresethemalerateofHCMVDNAofi

4、tsinternalorgans.ResultsRadixastragaligrainofcompoundprescribe42.0g/kg?21.0g/kgmalerateofHCMVDNAofsetsesobviouslyarriveinthemodelset(P<0.05).ConclusionThcradixastragaligrainofcompoundprescribetreatmentinfectionHCMVmicehadcertainlyfundion.Keywords:PCR;Radixastragaligrai

5、n;Humancytomegalovirus;Smal1ratmodelofHCMVinfection人巨细胞病毒(HumanCytomegalovirus,HCMV)感染十分普遍。在妇产科，妊娠妇女孕早期原发HCMV感染可造成流产、早产、死胎、畸形，宫内生长迟缓、智力低下及听力损害等。目前，尙无对妊娠期HCMV活动性感染安全有效的治疗方法。本硏究首次采用小鼠尾静脉染毒法建立HCMV全身获得性感染模型，并进行了复方黄茂颗粒对感染小鼠体内硏究，应用HCMVPCR测定，证实黄茂颗粒组HCMVDNA阳性率明显低于模型组。现将本硏究结果报道

6、如下。1材料1・1标本收集和处理选取60只雄性小鼠，18〜22g，共分6组，每组10只，分别为复方黄罠颗粒大、中、小剂量组，阴性对照组，模型(病毒)组和阳性对照组。均采用小鼠尾静脉注射HCMV10・1，每只0.1ml,阴性对照组注射0.9%生理盐水，每只0・1ml，于染毒第2天开始治疗。大剂量组42.0g/kg，中剂量组21.0g/kg，小剂量组10.5g/kg，阴性对照组及模型(病毒)对照组均给蒸镭水，上述各组给药途径为灌胃，每天每只0.5ml，阳性对照组（更昔洛韦），实验结束时，取主要脏器做HCMVPCR。1.2HCMVPCR引

7、物按文献〔1〕，由山东省医科院生物医学硏究中心合成并纯化'引物序列：上游引物为5'・GATCCGACCCATTGTCTAAG-3'，下游引物为5'-GGCAGCTATCGTGACTGGGA-3'。2实验方法PCR检测标本中HCMV・DNA片段，每次扩增均设标准阳性和阴性对照。PCR体系25“1,其中含lOxPCR缓冲液2.5“1，2.5mmol・L・ldNTP21“1,上下游混合物（各10mmol1）1.5仏1，TaqDNA聚合酶1仏1，标本处理后取10"1提取物，无菌蒸饴水加至25“1，覆以30"1无菌石蜡油。反应按94°C1mi

8、n，56°C1min,71"C1min,40个循环J最后于72C保温10min，扩增物经2%琼脂电泳，漠乙淀染色，紫外灯下检测荧光条帯，与阳性模板同一位置即为阳性。产物长度151bp。3结果上述结果表明，黄英颗粒组HCMV・DNA阳性