应用人巨细胞病毒

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1、应用人巨细胞病毒【关键词】应用摘要：目的应用人巨细胞病毒-核酸扩增（HCMVPCR）反应探讨中药复方黄芪颗粒对感染HCMV小鼠治疗作用。方法用小鼠尾静脉染毒法建立HCMV全身获得性感染模型，并用复方黄芪颗粒给小鼠灌胃治疗，然后应用HCMVPCR反应测定其内脏HCMVDNA阳性率。结果复方黄芪颗粒42.0，21.0g/kg组HCMVDNA阳性率明显低于模型组（P＜0.05）。结论复方黄芪颗粒对感染HCMV小鼠有一定的治疗作用。关键词：人巨细胞病毒-核酸扩增（HCMVPCR）；复方黄芪颗粒；人巨细胞病毒；人巨细胞病毒感染小鼠模型EvaluationofCurativeEffect

2、ofRadixAstragaliGrainSmallRatoutreatingHumanCytomegalovirusInfectioninMicebytheHCMV-PCRRespondAbstract：ObjectiveTostudythecurativeeffectofradixastragaligrainofChineseherbalmedicinepoundprescribeonrightinfectionHCMVbyHCMVPCRrespond.MethodsDyethepoisonmethodtoestablishtheHCMVicetailsexydyethe

3、model,andcounteracttheradixastragaligrainofpoundprescribetothemicerespectivelythetreatment,thenapplytheHCMVPCRtorespondtomeasuresethemalerateofHCMVDNAofitsinternalorgans.ResultsRadixastragaligrainofpoundprescribe42.0g/kg，21.0g/kgmalerateofHCMVDNAofsetsesobviouslyarriveinthemodelset(P0.05).C

4、onclusionTheradixastragaligrainofpoundprescribetreatmentinfectionHCMVmicehadcertainlyfunction.Keyancytomegalovirus;SmallratmodelofHCMVinfection人巨细胞病毒（HumanCytomegalovirus,HCMV）感染十分普遍。在妇产科，妊娠妇女孕早期原发HCMV感染可造成流产、早产、死胎、畸形，宫内生长迟缓、智力低下及听力损害等。目前，尚无对妊娠期HCMV活动性感染安全有效的治疗方法。本研究首次采用小鼠尾静脉染毒法建立HCMV全身获得性感

5、染模型.freell,阴性对照组注射0.9%生理盐水，每只0.1ml，于染毒第2天开始治疗。大剂量组42.0g/kg，中剂量组21.0g/kg，小剂量组10.5g/kg，阴性对照组及模型（病毒）对照组均给蒸馏水，上述各组给药途径为灌胃，每天每只0.5ml，阳性对照组（更昔洛韦），实验结束时，取主要脏器做HCMVPCR。1.2HCMVPCR引物按文献［1］，由山东省医科院生物医学研究中心合成并纯化，引物序列：上游引物为5′-GATCCGACCCATTGTCTAAG-3′，下游引物为5′-GGCAGCTATCGTGACTGGGA-3′。2实验方法PCR检测标本中HCMV-DNA片

6、段，每次扩增均设标准阳性和阴性对照。PCR体系25μl,其中含10×PCR缓冲液2.5μl，2.5mmolL-1dNTP21μl,上下游混合物（各10mmolL-1）1.5μl，TaqDNA聚合酶1μl，标本处理后取10μl提取物，无菌蒸馏水加至25μl，覆以30μl无菌石蜡油。反应按94℃1min，56℃1min,71℃1min,40个循环，最后于72℃保温10min，扩增物经2%琼脂电泳，溴乙淀染色，紫外灯下检测荧光条带，与阳性模板同一位置即为阳性。产物长度151bp。3结果上述结果表明，黄芪颗粒组HCMV-DNA阳性率明显低于模型组，与模型组比较有明显差异（P0.05）

7、，与阴性对照组相近，小剂量组与模型组相比虽无统计学意义，但其阳性率明显低于模型组。结果见表1，图1~2。表1复方黄芪颗粒对感染HCMV小鼠HCMV-DNA影响组别（略）4讨论诊断HCMV感染主要依靠实验室检查。利用特异抗HCMV单克隆抗体的免疫组化技术，从病毒分离培养、病变组织、脱落细胞及外周血中直接检测到HCMV抗原，提示存在活动性HCMV感染，是诊断HCMV感染可靠的依据。因受灵敏度限制，检测HCMV抗原的免疫组化技术尚难于检出微量存在的病毒抗原，不能满足临床诊断要求，提高其灵敏度亟待解决［3］。原