α-l-鼠李糖苷酶发酵过程放大研究——从5l到30l发酵罐

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1、OL—L一鼠李糖苷酶发酵过程放大研究——从5L到30L发酵罐张雪铭1，马骏2。魏春3，应向贤3，汪钊3(1．浙江省天正设计工程有限公司，浙江杭州310012：2．浙江海正药业股份有限公司。浙江台州318000；3．浙江工业大学生物与环境工程学院。浙江杭州310014)摘要：以产a-L-鼠李糖苷酶(a—L一1，2一鼠李糖苷酶和a—L一1，6一鼠李糖苷酶)的黑曲霉A5．pergillusnigerWZ001为考察对象，研究了从5L发酵罐到30L发酵罐的通气量和搅拌转速的放大工艺。通气量按三种准则、搅拌转速按两种准则放

2、大。通过实验验证，优选得到最佳放大准则为：通气量按1．5倍空气表观线速度进行放大、搅拌转速按搅拌桨叶尖线速度放大。在该优化的放大工艺条件下，30L发酵罐中a—L一1，2一鼠李糖苷酶和d—L一1，6一鼠李糖苷酶的产量分别为2515U／mL和3612U／mL，达到5L发酵罐的水平。关键词：黑曲霉；仅一L一鼠李糖苷酶；发酵放大：搅拌桨Amplificationofthefermentationprocessfora-L-rhamnosidase———_fr0ITI5Lto30LfermenterZHANGXue-min

3、91，MAJun2，WEIChun3，YINGXiang—xian3，WANGZha03(1．Zhejiangtitandesign&eneineeringCo．，Ltd．，Hangzhou310012，China；2．ZhejiangHisunPharmaceuticalCo．，Ltd．，Taizhou318000，China；3．CollegeofBiologicalandEnvironmentalEngineering，ZhejiangUniversityofTechnology，Hangzhou31001

4、4，China)Abstract：Toproducea—L—rhamnosidase(O／一L一1，2一rhamnosidaseandO／一L一1，6一rhamnosidase)AspergiUusnigerWZ001wasusedtoinvestigatetheamplificationtechnologyonaerationrateandagitationspeedfrom5Lto30Lfermenter．Aerationratewasamplifiedbythreekindsofstandardsandag

5、itationspeedwasamplifiedbytwokindsofstandards．Bytheexperimentsverification，weob_tainedthebestamplificationcriteria：aerationratewasamplifiedwith1．5timestheapparentlinearspeedandagitationspeedwasamplifiedwithbladetipspeed．Undertheoptimizedconditionsofam。plifica

6、tiontechnology，theyieldsofd—L一1，2-rhamnosidaseanda-L-1，6-rhamnosidasewere2515U／mLand3612U／mLin30Lfermentor，respectively，alevelequaltothatin5Lfermenter．bladeKeywords：Aspergillusniger；OL——L——rhamnosidase；fermentationamplification；stirring基金项目：科技部科技型中小企业技术创新基金(1

7、2C26213302753)；浙江省自然科学基金(LYl2806010)发酵科技通讯第42卷a—L一鼠李糖苷酶(EC3．2．1．40)是一种水解5L和30L发酵罐培养条件：温度30℃，初始酶。可广泛应用于食品和药品行业中，用于橘汁脱pH5．5，搅拌转速200-600r／min，通气量0．1～15vvm。苦、葡萄酒风味改良、生产功能饮料、生产甜味剂1．40【一L一鼠李糖苷酶的检测方澍111以及生产胃药和固醇类药物的前体Ii-3l。鉴于其广样品预处理：将发酵液于8000r／rain离心10阔的工业用途，以发酵法规模化

8、生产a—L一鼠李糖rain，上清粗酶液用于测定a—L一鼠李糖苷酶酶活苷酶具有重要意义。设计和建立规模化的a—L一鼠力，菌体沉淀用于测定菌丝体活力。4℃下保存、李糖苷酶发酵工厂首先需要确立规模化生产的工备用。艺流程，但是目前a—L一鼠李糖苷酶发酵技术多停将1．9mL浓度为0．2％柚皮苷标准液与2．0留在实验室研究阶段嗍。应用到工厂生产工艺尚mLpH4．5的醋酸盐缓冲液混匀，