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时间:2017-12-07
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1、·生物技术·北方园艺2OLO(18):164~166苏州野生水仙小鳞茎诱导的初步研究姜丽丽,蔡平,顾林平,黄雷芳,郑丽屏,王杰青(】.苏州大学建筑与城市环境学院园艺系,江苏苏州215123;2.苏州市金庭镇农林服务中心,江苏苏州215111)摘要:以苏州三山岛上野生水仙鳞茎为材料,通过4C低温预处理4~1O周与未经过低温预处理(室温)对照,再以双鳞片为外植体,通过5种激素(6-BA、NAA、KT、2,4一D、IBA)的配比组合试验,筛选出苏州野生水仙分化最适培养基,建立快繁体系。结果表明:未经过低温预处理的鳞茎切片污染较重,成活率最低为5.o,最高仅25.o。经过4℃低温预处
2、理4~10周的鳞茎切片污染率显著降低,成活率最低为25.o,最高达91.7;诱导的最佳培养基为MS+6-BA3.2rag/I+NAA0.02mg/L,平均诱导产生小鳞茎4~5个,增殖率达322.22。关键词:野生水仙;组织培养;小鳞茎诱导中图分类号:S682.2—1文献标识码:A文章编号:1001-0009(2010)18一O164一O3水仙通常以自然分球繁殖法为主,即将母球上自然1材料与方法分生的小鳞茎掰下来作为种球,另行栽植培养,从种球1.1试验材料到开花球需要培养3~4a,此法繁殖系数小,远不能满苏州太湖三山岛野生水仙,于2009年1月采集,然足生产上的需求。目前对福建
3、漳州、上海崇明等地水仙后种植在苏州大学校园内,待叶片枯死后取出鳞茎假植组织培养技术研究报道很多,但对苏州野生水仙(Nar—于沙地里备用。CiSSlgStazettavar.chinensisR0em.)的研究甚少。苏州野试剂:6-BA购自上海源聚生物科技有限公司;NAA生水仙具有花期长、花大、花艳、花香、耐寒、病虫少等优和KT购自北京拜尔迪生物生化有限公司;2,4D和点[2。,在野外主要靠自身繁殖,至今这一野生资源还未IBA购自国药集团化学试剂有限公司。被开发利用,因而建立苏州野生水仙快速繁殖的方法对1.2试验方法其保护和利用具有较重要意义。该研究采用双鳞片法1.2.1球茎预
4、处理球茎置于4℃冰箱中预处理4~10植物组织培养技术快繁苏州野生水仙.试验表明,未经周和不经过低温预处理。过低温预处理(室温)的鳞茎切片污染较重,成活率最低l_2.2消毒方法取假植于沙地的1a生或2a生苏州为5.0,最高仅25.O;经过4C低温预处理4~10周野生水仙鳞茎为材料,不经过低温预处理(室温)的球茎的鳞茎切片污染率显著降低,成活率最低为25.O.最和置于4℃冰箱中预处理4~10周的球茎,均剥去鳞茎高达91.7~/0。通过使用5种植物生长调节激素组合试表面腐烂干枯的鳞片,在流水下用试管刷仔细洗去根部验,发现MS+6-BA3.2rag/I.-卜NAA0.02mg/I培养
5、泥沙,直至冲洗干净.然后放人超净工作台中,用3种方基诱导苏州野生水仙形成小鳞茎的时间最短,形成的小法进行消毒处理。消毒方法T:将水仙球浸入75酒精鳞茎数量较多,平均产生4~5个,最多9个,诱导增殖率中30s,转人0.1升汞中灭菌7mim消毒方法Ⅱ:将水仙达322.22,比何玮毅等、陆春芳等’。水仙组培快繁球浸入75酒精中30S,转入0.1升汞中灭菌10rain,产生白色小球状体的时间缩短4~8d,多形成小鳞茎然后剥除最外层鳞茎片;消毒方法Ⅲ:水仙球浸入752~3个。组织培养快速繁殖效果比较明显,为苏州野生酒精中30s,转入0.1升汞中灭菌7min,然后置于4IC水仙工厂化育苗
6、奠定了基础。冰箱中1d,第2天取出,在无菌环境下剥除最外层鳞茎片,最后3种消毒的鳞茎球均用无菌水冲洗5~7次,每次3~5min,消毒滤纸吸干后切块。第一作者简介:姜丽丽(1986一),女,在读硕士,研究方向为园林植1.2.3诱导培养将消毒好的鳞茎球取出,首先切去鳞物生物技术。Kmail:tiankong77@163.com。茎球2/3部分,留下带鳞茎盘的1/3部分,将其平铺呈辐通讯作者:蔡平(1955),男,博士,教授,研究方向为园林植物与观射状切块,每块带2~3层鳞片,长约0.7~1.0cm,宽约赏园艺。Dmail:caip@suda.edu.cn。0.3~0.5cm。以切
7、好的带鳞茎盘的双鳞片为外植体,将基金项目:苏州市科技发展计划(农业)资助项目(SNG0825)。其接种于诱导培养基。诱导培养基为基本培养基MS,收稿日期:20lO—O6—07加入不同外源激素的组合及蔗糖3OI、琼脂粉7.0g/I,164北方园艺2OLO(18):164~166·生物技术·pH5.8,设置6组不同激素配比。激素组合I:6-BA表l低温及消毒处理对苏州野生水仙球3.2mg/L+NAA0.02mg/I(激素单位下同);激素组合茎组织切块成活率的影响Ⅱ:KT1.0+NAA1.0;激素组合Ⅲ:6一
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