秋水仙素诱导番茄多倍体初步及研究

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1、...页眉秋水仙素诱导番茄多倍体初步研究王倩摘要：以发芽的番茄种子为处理对象，分别用1.0%、0.8%、0.6%、0.4%的秋水仙素浸泡。研究不同浓度和不同时间对番茄多倍体的影响。结果表明,处理对象的诱导效果受秋水仙素浓度和处理时间两方面的影响。结果表明，0.8%＋1ｄ的秋水仙素处理萌发的番茄种子效果最为明显。诱变后产生的多倍体植株与二倍体植株相比,具有茎增粗、叶片加厚且叶色浓绿。关键词：秋水仙素番茄多倍体诱导番茄是世界上栽培最广泛的蔬菜作物之一，也是遗传学、育种学和生物工程等学科研究中的重要对象。[1]已被科学家

2、证明含有多种维生素和营养成分，如番茄含有丰富的维生素C和A以及叶酸、钾这些主要的营养元素。特别是它所含的茄红素，对人体的健康更有益处，而一些水果如西瓜、柚、杏只含有少量的茄红素。据营养学家研究测定：每人每天食用50克～100克鲜番茄，即可满足人体对几种维生素和矿物质的需要。番茄含的“番茄素”，有抑制细菌的作用；含的苹果酸、柠檬酸和糖类，有助消化的功能。番茄含有丰富的营养，又有多种功用被称为神奇的菜中之果。番茄内的苹果酸和柠檬酸等有机酸，还有增加胃液酸度，帮助消化，调整胃肠功能的作用。番茄中含有果酸，能降低胆固醇的含

3、量，对高血脂症很有益处。番茄富含维生素A、维生素C、维生素B1.维生素B2以及胡萝卜素和钙、磷、钾、镁、铁、锌、铜和碘等多种元素，还含有蛋白质、糖类、有机酸、纤维素。但是在生产中，栽培的二倍体番茄，其抗寒、抗病、抗旱的能力均较差。而多倍体番茄其抗性比二倍体番茄强。且营养价值高出高出二倍体番茄进一倍，生产上有较大的应用价值。因此番茄的多倍体诱导具有重要的实际价值[1]。在自然条件下，单倍体自交结实率低，往往需要借助人为的措施，使其单倍染色体加倍。目前应用最广泛最有效的使用秋水仙素处理。秋水仙碱对种子、幼芽、花蕾、花粉

4、、嫩枝都可产生诱变作用，它的主要作用是抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使染色体不走向两极，而被阻止在分裂中期，这样细胞不能继续分裂，产生染色体加倍的核，若染色体加倍的核继续分裂，就形成多倍体组织，由多倍体组织产生的性细胞，其配子是多倍性的，因而可通过有性繁殖方法把多倍体繁殖下去[2,3]。人工诱导多倍体的方法有物理和化学两类，物理方法包括各种射线，异常温度、调整高心力、高温处理；化学方法是秋水仙素、笑气、咖啡碱等，其中，秋水仙素被广泛采用。[4]还有一种在植物多倍体育种工作中应用前景广阔的技术即原生质体和体细胞融合技术

5、[5]。水仙素处理材料的常用方法有：浸渍法、浸种法、注射法、琼脂法、滴液法等。....页脚...页眉（1）浸种法，将材料的根浸泡在秋水秋水仙素一定时间，流水洗净根部药液后，把植物栽在土里。（2）浸种法，用秋水仙素直接浸泡萌发的种子。（3）注射法，在茎尖生长点注射药品。（4）琼脂法，在刚展开的子叶生长点中央涂抹含有秋水仙素琼脂凝胶，罩保鲜膜保湿，以免琼脂干裂，处理后冲洗多次，消除残毒。[6]陈圣栋，杨建平等人[7]用秋水仙素处理番茄种子诱导多倍体的研究中最佳组合为0.4%，12小时。本实验有意研究长时间处理番茄种子是

6、否更有益于诱导多倍体。1材料和方法1.1材料1.1.1实验材料哈尔滨金花农业有限公司出品的贼不偷番茄种子1.1.2主要仪器及试剂培养皿、三角烧瓶；70%酒精，升汞，秋水仙素1.2方法1.2.1番茄种子的预处理选取籽粒饱满的番茄种子放入经高压灭菌的空三角烧瓶中，首先用70%酒精浸泡消毒15ｓ，无菌水冲洗2～3次，然后放入0.1%的升汞溶液灭菌10～12min，无菌水清洗3～5次。分装入铺有吸水纸的培养皿中，置于26±1℃条件下，暗培养，等候其生根。1.2.2多倍体的诱导采用浸泡法[8]当根尖长至0.5～1.0㎝时，将

7、其转移到9个培养皿中，分别用不同浓度的秋水仙素溶液进行处理（0.0%、1.0%、0.8%、0.6%、0.4%，其中0.0%作为对照），每个处理15个种子。在25℃恒温箱中继续培养。取材的时间分别为1ｄ、2ｄ、3ｄ、4ｄ。1.2.3多倍体的鉴定形态学观察。观察茎、叶厚、叶色。根根据多倍体茎粗、叶片增厚、叶色浓绿的形态特征选择突变株。[5]2结果与分析2.1种子处理将萌发的番茄种子经不同浓度秋水仙素溶液处理后移栽到培养皿中，以未经处理种子为对照，结果发现，对照苗出苗一致，约10天出齐。经秋水仙素处理过的种子发芽时间比对

8、照发芽时间晚3-5....页脚...页眉天。秋水仙素不同浓度，不同处理时间组合的结果之间差异显著：随着秋水仙素浓度的提高，处理时间的增加，种子发芽率降低，诱变率提高（表1），整个处理组合均反映了这一趋势。其中浓度0.8%处理1天诱变率比较高为73.3%。表1不同浓度秋水仙素处理番茄种子的结果处理浓度%时间d种子数粒出苗数株死亡率%诱变数株诱变率%1.0115