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1、分类号S567.239密级公开UDC635全日制硕士专业学位研究生学位论文金线莲多倍体诱导及杂交育种初步研究作者姓名：滕人达指导教师：邵清松副教授专业学位名称：农业推广硕士领域名称：林业研究方向：药用植物育种所在学院：林业与生物技术学院论文提交日期：2017年2月23日浙江农林大学2016年11月1日ZhejiangA&FUniversityDissertationfortheDegreeofMasterPreliminaryStudyonPolyploidInductionandCrossBreedingofAnoectochilusro
2、xburghiiCandidate:TENGRendaAdviser:SHAOQingsong,AssociateProf.Specialty:ForestryDateofSubmission:2017.02.23ZhejiangA&FUniversityLin’an,zhejiangprovince,P.R.ChinaNovember,2016摘要本研究通过秋水仙素和二甲戊乐灵对金线莲进行多倍体诱导，检测并鉴定其倍性差异，确定是否倍性水平越高，金线莲品质越好，植株越粗壮，抗逆性越强，进而产生更为优良的金线莲品系。除此之外，采用杂交技术从亲
3、本获得优良性状，结合尖叶金线莲与圆叶金线莲的优良特点，创建具有高活性成分及抗病性强的新品系。采用不同浓度的秋水仙素和二甲戊乐灵对金线莲茎节进行多倍体诱导，得出秋水仙素最佳诱导条件：浓度为700mg·L-1，诱导时间24h，存活率达到50%，诱变率43.3%；二甲戊乐灵最佳诱导条件：浓度90mg·L-1，诱导时间48h，存活率达到56.7%，诱导率50.0%。获得的多倍体植株形态和对照株相比：叶片明显变大，根系茎节粗壮，但多倍体植株生长发育非常缓慢。实验还通过流式细胞术，确定了其在倍性水平上存在差异。将尖叶金线莲和圆叶金线莲进行种内杂交，用石
4、蜡切片技术和荧光显微镜观察胚胎发育和花粉-雌蕊相互作用，结果显示，花粉管生长可以到达胚囊完成双受精，进而说明，受精前障碍不是尖叶金线莲和圆叶金线莲杂交障碍的主要因素。杂交后胚胎发育异常，最终导致胚败育，进而验证了受精后障碍应是尖叶金线莲和圆叶金线莲杂交中结实率低的原因。同时，我们将败育的幼胚进行了胚胎拯救并成功培养出了杂种金线莲，为以后的金线莲新品种研究奠定了基础。关键词：金线莲，多倍体育种，种内杂交，幼胚拯救IABSTRACTInordertodetectandidentifytheploidydifferences,colchicine
5、andpendimethalinwereusedtoinducepolyploidinduction.Studyinordertodeterminewhetherthehigherthelevelofploidyis,thebetterqualityofAnoectochilusroxburghiihas,theplantmoresturdy,andthestrongertheresistance,whichresultedinmoreexcellentvarietiesofA.roxburghii.Inaddition,thestudyu
6、sedhybridtechnologytoobtainexcellenttraitsfromparents,combinedwiththeexcellentcharacteristicsofthenarrow-leafA.roxburghiiandthebroad-leafA.roxburghii,tocreatenewvarietieswithhighactivecomponentsandstrongdiseaseresistance.Inthisstudy,polyploidinductionwascarriedoutwithcolch
7、icineandpendimethalinatdifferentconcentrations.Theoptimummutagenicconditionsofcolchicinewereasfollows:concentrationof700mg·L-1,inductiontimeof24h,survivalrateof50%,andmutationrateof43.3%.Theoptimummutagenicconditionsofpendimethalinwereasfollows:concentrationof90mg·L-1,indu
8、ctiontimeof48h,survivalrateof56.7%,andmutationrateof50%.Thepolyploidplantsobtainedweremor
