黄喉拟水龟摩氏摩根菌的分离鉴定及系统发育分析

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1、第19卷第3期上海海洋大学学报Vo1.19.No.32010年5月JOURNALOFSHANGHAIOCEANUNIVERSITYMay,2010文章编号:1674—5566(2010)03—0358—06黄喉拟水龟摩氏摩根菌的分离鉴定及系统发育分析黎小正,韦信贤,童桂香,吴祥庆,庞燕飞(广西渔业病害防治环境监测和质量检验中心,广西南宁530021)摘要:从广西某黄喉拟水龟(MauremysmuticaCantor)养殖场发病的黄喉拟水龟的肝、肺分离到一致病性的菌株(HX081027),经人工感染实验证实其为

2、该病的病原菌。对该菌的形态、生理生化进行分析,试验结果与报道的摩氏摩根菌一致,表现为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌,无荚膜及芽孢,葡萄糖产酸产气,接触酶、脲酶、苯丙氨酸脱氨酶和鸟氨酸脱羧酶阳性,氧化酶、脂酶、DNA酶和赖氨酸脱羧酶阴性,甲基红阳性,VP反应阴性,MR阳性等特征。采用扩增细菌16SrDNA的通用引物对该菌的16SrDNA基因进行PCR扩增、克隆测序,得到1条长度为1506bp的核苷酸序列(GenBank登录号为FJ858185)。以该菌16SrDNA序列和GenBank数据库内同源性较高的细菌16

3、SrDNA序列进行同源性比对分析和构建系统发育树,结果显示分离菌HX081027与摩氏摩根菌属内相关菌株的同源性在98.8%~99.6%,且在系统发育树上与来源于鱼类的M.morganiiJCM1672聚为一支,结合形态及生理生化特点将其确定为摩氏摩根菌(。n加ffⅡmorganii)。关键词:黄喉拟水龟;摩氏摩根菌;分离鉴定;系统发育中图分类号:S947.1;S917文献标识码:AIsolation,identificationandphylogeneticanalysisofMorganellamorga

4、niiinMauremysmuticaCantorLIXiao—zheng,WEIXin—xian,TONGGui—xiang,WUXiang—qing,PANGYan—fei(CenterofDiseasePreventionandCure,EnvironmentalMonitoringandQualit)MonitoringofGuangxiFisher),Nanning530021,China)Abstract:Apathogenicbacterium(HX081027)wasisolatedfromt

5、heliverandlungofthediseasedMauremysmuticaCantor,andthebacteriumwasprovedtobethepathogenofthediseasethroughartificialinfection.Itsmorphological,physiologicalandbiochemicaleharaeteristicswerestudied,andtheycompletelymatchedtoallofthereferenceMorganellamorgani

6、i(morganii)strainwhichhasbeenreposed.Thebacteriaaregramnegative,rods,non—capsuleandspore;Glucose-positive,catalase—positive,urease—positive,phenylalaninedeaminase—positive,orinithinedecarboxylase—positive,oxidase—negative,lipase—negative,DNAase—negative,lys

7、inedecarboxylase—negative,methyl—redLpositive,VP-negative,MR—positive.The16SrDNAgenewasamplifiedbyusingtheuniversalprimers,andthePCRproductwasclonedandsequenced.Asequenceof1506basepair(bp)wasobtainedfromthebacteria(GenBankaccessionnumberFJ858185).Aphylogene

8、tictreewasconstructedbycomparingthe16SrDNAsequenceoftheisolatedstrain收稿日期:2009-05—07基金项目:广西水产品药物残留监控项目(桂渔牧函[2008]283号)作者简介:黎小正(1962一),男,高级工程师,硕士,主要从事水产品的检验检疫和渔业环境保护等方面的研究。Tel:077I一5301119.E—mail:lixz@t

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