螺旋藻c-藻蓝蛋白亚基分离及抗肿瘤活性研究

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1、浙江大学学报(理学版)第37卷第3期JournalofZhejiangUniversity(ScienceEdition)http：／／www．journals．zjn．edu．cn／sciVoM1．37No．32010年5月ay2010DOI：10．3785／j．issn．1008—9497．2010．03．016螺旋藻C一藻蓝蛋白亚基分离及抗肿瘤活性研究张昕，郦剑勇，龚兴国(浙江大学生命科学学院，生物化学研究所，浙江杭州310058)摘要：为解决C藻蓝蛋白分子较大，难以直接与细胞发生作用的问题

2、，对藻蓝蛋白亚基的分离纯化方法进行研究，并初步探讨了其对肿瘤细胞的抑制作用．对通过热变性、盐析和自制的羟基磷灰石吸附层析，从钝顶螺旋藻中获得高纯度的藻蓝蛋白(C—PC，A／A。>4．5)．C—PC用8mo卜I_。的尿素溶液变性，过CM—SepharoseF．F．阳离子交换层析、透析、复性，获得具活性的C～PC亚基．用CCK一8试剂盒分别研究了C—PC、d和B亚基对一个肺腺癌细胞株SPCA1的生长的影响，结果表明藻蓝蛋白及其亚基对该细胞株的生长具有抑制作用，0亚基效果最好，预示着它们具有一定的抗肿瘤

3、潜力．关键词：柱层析；复性；亚基；肺腺癌细胞株SPC—A一1；生长抑制作用中图分类号：Q5l文献标志码：A文章编号：1008—9497(2010)03—3l9一O5ZHANGXin，IdJian—yong，GONGXing—guo(InstituteofBiochemistry，CollegeoJ’lifeSciences，ZhejiangUni—versity，Hangzhou310058，China)IsolationofC—PCsubuni~fromspirulinaplatensisand

4、inhibitoryeffectonSPC。A‘1cellline．JournalofZhejiangUniversity(ScienceEdition)，2010，37(3)：319—323Abstract：InordertosolvethedifficultyofinteractionbetweenC—phycocyanin(C—PC)andcells，themethodsofisolatingandpurifyingCPCsubunitswereinvestigatedandtheantit

5、umoreffectsofthemontheSPC—A1cellswerestudiedalso．AhighefficiencyandrelativelyconvenientpurificationsystemwithtWO—stepself—composedHAchromatogramwasdevisedintheresearch，andobtainedpureC—PCwithOD62。／OD280Of4．5．AfterdenaturingthepurifiedC—PCbysodiumaceta

6、tebuffercontaining8tool·Lurea，thesubunitswereisolatedbycationexchangechromatographybyusingCMsepharoseF．F，thenthesubunitswererenaturedseparately．Bothofthetwosubunitshadstrongfluorescenceactivity．Theanti—tumoreffectofhighlypurifiedC—PC、aand8subunitwaste

7、stedongrowthandmultiplicationofhumanlungadenocarcinomacell1ine(SPCA一1)．TheresultsindicatedthattheBsubunitofCPCwasthepotentestanti—cancerfragmentunderthesameconcentrationconditioninvitro．KeyWords：chromatography；renature；activity；inhibitoryeffect；subuni

8、ts藻蓝蛋白是蓝藻、红藻等藻类的主要集光分子，近年来，国外有大量文献报道了藻蓝蛋白的抗传光效率极高l1．大量研究表明，藻蓝蛋白具有抗肿瘤活性，以及藻蓝蛋白诱发细胞调亡的原理_5]，引氧化j、清除自由基]、抗炎症、抗肿瘤Ⅲ4等作用，起了国内外广泛的兴趣．但是，对藻蓝蛋白亚基的分能有效预防和治疗多种疾病．藻蓝蛋白已广泛应用离少见报道．本文运用热变性的方法，从钝顶螺旋藻于食品、化妆品、医药等领域．根据其来源不同，可将中分离出C一藻蓝蛋白，研究获得组成其的两个亚基藻蓝蛋白分为C一藻蓝蛋白(