応用生物化学実験.pdf

《応用生物化学実験.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、応用生物化学実験担当者境正、江藤望研究室Ｓ３１２（境）、Ｓ５０６（江藤）英語名ExperimentofAppliedBiochemistry単位数１（選択）対象学年３実施時期前期集中オフィスアワー水曜日の昼休み（境）、月曜日の昼休み（江藤）実験のねらい第一部：２年生の時の生物化学実験で酵素の諸性質のうち最も基本的な至適pHおよび至適温度をアルカリフォスファターゼを用いて求める実験を行いました。そこで，この応用生物化学実験では酵素反応に影響を及ぼす金属イオンの影響について，ウシおよびニワトリの肝臓中のアルカリフォスファターゼを用いて調べます。さ

2、らに，酵素反応速上最も重要な定数の一であるKm値を実際に求めます。このKm値は酵素反応を理解する上で、非常に重要な性質です。金属イオンの実験と同様ウシの肝臓および消化管中のアルカリフォスファターゼを用い，そのKm値を求める方法について，以下の点を学びます。最初に，ミカエリス-メンテン式をどのように変換すれば良いかについて，検討します。さらに，得られた実験結果よりKm値を統計的手法により求めます。さらに，酵素阻害の形式を得られた結果から明らかにするにはどのようにすれば良いか考える。以上の結果を基に，酵素反応に金属イオンがどのような影響を与えるか

3、について再確認します。また，多くの酵素が金属イオンにより様々な影響を受けていることについて，他の多くの酵素についても各自で調べることにより，新たな課題に対して色々な手法を通して検索する能力を養います。また，酵素反応速度についての基礎的な知識を再確認するとともに，新たな課題に対して，どのような手法を用いれば解決できるかについての能力を養います。第二部：生物化学分野に限らず、多くの分野で欠かすことのできない物質の分離テクニックに関して、その原理を理解するために、モデル実験を行います。この実験では、学生自身が実験条件を考案することで、原理をより深く

4、学べるようにしています。従って、受講生が皆同じ実験を行うとは限りません。サンプルに応じて実験条件を選択するトレーニングを積んで下さい。教育の達成目標１酵素活性に及ぼす金属イオンの影響を理解できるようになる。また，他の酵素においても活性に金属イオンが影響を及ぼしていることを理解できるようになる。２酵素のKm値を測定できるようになる。３酵素の阻害形式を決定できるようになる。４酵素の基本的な性質について理解できるようになる。５ゲルろ過カラム選択の判断ができるようになる。６緩衝液を作製できるようになる。７イオン交換カラムと緩衝液をサンプルに応じて選択

5、できるようになる。８アフィニティーカラムを用いて抗体を精製できるようになる。９ELISAを実施できるようになる。10ELISAで使用する抗体を選択し、実験系をデザインできるようになる。カリキュラムの中での位置付け本講義は、応用生物科学科の学習・教育目標において下記の項目に該当します。Ｅ．応用生物科学分野に関する先端的、独創的な科学技術に寄与できる基礎的能力と創造力を身につけ、さらに目的達成のために計画的に調査研究を進め、まとめる能力を修得させる。３）実験データの意味を正しく考えることができる。（○）４）応用生物科学分野の実験計画を立案できる。

6、（○）Ｇ．下記の6分野の応用生物科学に関する専門的技術に関する基礎知識とそれらを応用できる能力を身につけさせる。（○）応用生物化学、微生物機能開発学、植物機能開発学、植物生産化学、食品製造学、食品栄養生化学受講生へのメッセージ生物化学系の学生実験では、定性・定量・酵素反応・物質の分離という４本柱から成ります。生物化学実験（必修）と応用生物化学実験（選択）では、次のプログラムを用意しています。生物化学実験応用生物化学実験定性ビュレット反応、ニンヒドリン反応、キサントプロテイン反応、Hopkins-Cole反応、ニトロプルシッド反応定量Lowry

7、法（タンパク質）、DNS法（還元糖）A280、ELISA酵素反応至適pH測定（酸性、アルカリフォスファター酵素活性に及ぼす金属イオンの影響ゼ）km値測定（アルカリフォスファターゼ）αアミラーゼ活性測定物質の分離SDS-PAGEゲルろ過、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィーその他基本アミノ酸の緩衝作用観察バッファーの作製法、動物細胞培養、透析この学生実験を受講するにあたって，生物化学に関する知識を必要としています。また，生物化学実験で履修したことを再確認しておいてください。選択科目ですので、熱意ある学生のみの受講を希望

8、します。実験期間は１週間単位で２週間受講してもらいます（開講期間は３週間）。評価方法・評価基準小テストの成績（第一部）、レポート内容等によって評価します。上記に掲げ