应用Plackett-Burman设计法筛选大豆花粉萌发的主要影响因素-论文.pdf

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1、■农业生产中图分类号:$565.1文献标志码:B文章编号:1674-3547(2014)03-0003-04应用Plackett—Burman设计法筛选大豆花粉萌发的主要影响因素王昌陵,宋书宏,孙旭刚,王文斌(辽宁省农业科学院作物研究所,沈阳110161)摘要:通过单因素试验筛选出大豆花粉萌发培养基最佳碳源为蔗糖,Ca2十源为CaC1,有效植物生长调节剂为GA,;采用Plackett—Burman"~.计法对选取的8个相关影响因素进行了评价,筛选出3个主要影响因素,分别为初始pH、蔗糖和GA,,且3个因素在PB设计的水平范围内对响应值的影响均为正效应。关键词

2、:大豆花粉;萌发;Plackett—Burman"~.计;影响因素ApplicationofPlackett-_-BurmanDesigninIndentifyingtheMainFactorsInfluencingtheGerminationofSoybeanPollenWangChangling,SongShuhong,SunXugang,WangWenbin(LiaoningAcademyofAgriculturalSciences,CropResearchInstitute,Shenyang110161,Liaoning,China)Abstract

3、:Inthegerminationexperimentofsoybeanpollen,singlefactordesignwasusedandfoundthatthebestcarbonsourcewassucrose,suitableCasourcewasCaC12,andtheproductiveplanthormonewasGA3.Subsequently,themethodologyofPlackett—Burmandesignwasundeaakentoevaluatetheinfluenceoftheeightrelatedfactors.Thr

4、eeparameterssignificantlyinfluencedgermination,theyweretheinitialpH,sucroseandGA3,andalloftheminfluencedthegerminationofsoybeanpollenpositivelywithindesignedleve1.Keywords:Soybeanpollen;Germination;Plackett—Burmandesign;Factors收稿日期:2014—03—06;修回日期:2014—03—20第一作者:王昌陵,助研,主要从事大豆转基因研究,

5、E—mail:bp672155@gmail.tom基金项目:转基因生物新品种培育重大专项(2013ZX08004005—003)通讯作者:王文斌,研究员,主要从事大豆遗传育种研究,E—mail:lnsoybean@163.corn农业生产■花粉萌发是高等植物完成有性生殖的重要环微镜进行观测。当花粉管的长度大于花粉粒的直径节n,花粉萌发率和花粉管长度是衡量花粉生活力的时被计为萌发。统计萌发和未萌发的花粉粒数,根主要标志。无论在大豆常规育种中进行亲本的选择据公式:萌发率=萌发的花粉数/总的花粉数×100%配置,还是开展杂交大豆育种试验,都需要研究大计算出萌发率。

6、每个试验处理随机选取3个视野,豆花粉的萌发问。每个视野所统计的花粉粒不少于100粒。花粉的萌发是花粉粒吸水后,体积增大,内部1.4.2花粉管长度的测定选取已萌发的花粉用显膨压增加,使花粉粒内壁沿萌发孔向外突出,形成微镜随机选取3个视野拍照,用Image—ProPlus图像花粉管的过程。花粉粒的萌发启动是一个较复杂的分析软件测量花粉管的长度。每个样品至少测定50过程。多种植物花粉的离体萌发研究表明:花粉离个花粉管,计算平均长度和标准差。体萌发的基本条件需要有碳源、矿物质元素及生长1.5单因素试验调节剂的参与,只有在培养基中含有足量且合适的以30mmol/L的M

7、ES为母液,加入10%蔗糖+营养组分并在适宜的pH和温度等条件下,花粉才能0.05%Ca(CaCI)+0.02%H3BO+10%PEG一4000等成正常萌发生长。分,调至pH6.0,作为基础培养基。在探讨碳源、大豆花粉萌发能力的差异直接影响有性繁殖能Ca和植物生长调节剂等单因素的影响时,保持基力及育种价值的评价。而前人对于大豆花粉离体培础培养基的其他组分不变,只改变探讨因素的种类养的报道较少,适宜大豆花粉萌发的培养条件尚需和浓度,在相同条件下培养并测定花粉发育指标。探索。应用Plackett—Burman(PB)设计法筛选了大豆1.5.1碳源的选择试验分别使

8、用蔗糖、麦芽糖、葡花粉萌发的主要影响因素[61,旨在

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