细胞代谢组学用于羽扇豆醇干预人乳腺癌细胞 MCF-7的机理探究-论文.pdf

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1、2014年3J]色谱Vo1．32NO．3March20l4ChineseJournalofChromatography278～283研究论文DOI：10．3724／SP．J．1123．20l3．1l010摘要：应川丁气相色谱一质谱联J1](GC—MS)的代谢组学方法结合细胞用期实验，研究制扇雕体外抑制人乳腺癌乡【H胞MCF一7增殖的作用机理。代谢组学的研究结果表明：通过交偏最小方差判别分析(OPLS—DA)叮以很好地区分羽痢～Z雕f1：用的MCF一7细胞代谢谱与对照绀细胞代鲥谱，模型参数为：R=Ycum=0．988，QYcum=0．964VIP(variable

2、importanceintheprojection)值大于1的差异代谢物进一步川t检验进干J-化分析，选择t<0，05(VIP>1)的代f9If物作为羽扇豆醇作用组的生物标志物，得到琥珀酸、磷酸、亮氨酸、亮氨酸等l1种代埘差异物。结合羽崩豆醇将细胞胤期抑制侄G1期这一现象，推测羽扇醇町能是主要抑制r三羧酸循环f}J的琥舶n先辅酶A的乍成和底物磷酸化，ij成ATP的反应来抑制MCF一7细胞的增殖。本实验从代谢组学角度为乳腺螂抗jIf1瘸rdL$提供新的线索关键词：气卡l{色谱一质谱；羽扇醇；MCF一7细胞；乳腺癌；抑制机理；交偏最小方差判别分析；细胞代谢组学；细胞

3、川期中图分类号：0658文献标识码：A文章编号：1000—8713(2014)03—0278—06Abstract：TheobjectiveofthisresearchistoinvestigatethesuppressiveeffectsoflupeolonMCF一7breastcancercells，andexploreitsmechanismoninhibitingtheproliferationofMCF一7cellsbasedoncellmetabonomicsandcellcycle．Gaschromatography—massspectrometr

4、y(GC—MS)wasusedinthecellmetabonomicsassaytoidentifymetabolitesofMCF·7cellsandMCF一7cellstreatedwithlupeo1．Then，orthogonalpartialleastsquaresdiscriminantanalysis(OPLS—DA)wasusedtoprocessthemetabolicdataandmodelparametersofOPLS—DAwereasfol—lows：RYcum=0．988，QYcum=0．964，whichindicatedthat

5、thesetwogroupscouldbedistin—guishedclearly．Themetabolites(VIP(variableimportanceintheprojection)>1)wereana—lyzedbyt-test，andfinally，metabolites(t<0．05)wereidentifiedtobebiomarkers．Elevenmetabolitessuchasbutanedioicacid，phosphoricacid，L—leucineandisoleucinewhichhadasignificantcontribu

6、tiontoclassificationwereselectedandpreliminarilyidentifiedduetotheaccuratemass．CellcycleassaywasanalyzedbyFACSCalibur．SincethecellsinthephaseofGlwereincreasedsignificantlyafterthetreatmentoflupeol，wespeculatedthatlupeolhasabloc—kingefectonthegenerationofsuccinyl—CoAandthereactionofsu

7、bstratephosphorylatiOnoftricarboxylicacidcycleofMCF一7cells．ThisstudyprovidedanovelapproachtothemechanismresearchonthelupeoltreatmentonMCF一7breastcancercellsbasedoncellmetabonomics．Keywords：gaschromatography—massspectrometry(GC—MS)；lupeol；MCF一7cells；breastcancer；inhibitionmechanism；or

8、thogonalpart