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1、核农学报2013,27(12):1892—1896JournalofNuclearAgriculturalSciences文章编号:1000—8551(2013)12-1892~5山豆根、肉豆蔻提取液对西兰花主要致腐菌抑菌效果研究李文香孙树杰王士奎王丽娇张圣杰(青岛农业大学食品科学与工程学院/青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室山东青岛266109)摘要:为探讨山豆根、肉豆蔻中草药提取液对西兰花2种主要致腐真菌抑茵效果的影响,配制了山豆根、肉豆蔻提取液,添加到马铃薯葡萄糖液体培养基中,制成带药培养基,分剐接种2种致腐
2、茵一链格孢菌、核盘茵,28℃下恒温培养。通过测定培养液菌体湿重、电导率、蛋白质含量以及菌体蛋白SDS—PAGE电泳,研究了中草药提取液处理对西兰花主要致腐茵抑茵效果的影响。结果表明:与对照相比,2种处理均能抑制茵体湿重的增加,增大培养液电导率,延缓培养液中蛋白质的消耗,减少菌体蛋白的含量及种类。其中,山豆根提取液抑茵效果最好。关键词:山豆根;肉豆蔻;西兰花;链格孢菌;核盘茵;抑菌效果西兰花(BrassicaoleaceaL.)亦称青花菜、绿菜花,属十字花科芸苔属甘蓝变种。西兰花富含多种营1材料与方法养及功能成分¨,能延
3、缓衰老,增强人体免疫力,具有预防和抵御肿瘤的效果I4。西兰花花球极易黄化,1.1试验材料但在低温贮藏过程中叶绿素降解受到很好的抑制,而山豆根、肉豆蔻:选取优质中草药山豆根、肉豆蔻致腐真菌的繁殖是西兰花采后损失的主要原因之一,各100g,购自青岛同方药店;严重影响西兰花的商品价值。黑斑病和菌核病是菌种:链格孢菌、核盘菌。由腐烂的西兰花上分离西兰花常见的致腐病害,它们分别是由芸苔生链格孢获得。、菌[Ahernariabrassicicola(Schw.)Wiltshire]和核盘菌1.2试验方法[Sclerotiniasc
4、lerotiorun(Lib)deBary]引起的。据1.2.1山豆根、肉豆蔻提取液制备方法料液比为文献报道,山豆根中含有生物碱、山豆根多糖及黄酮等1:5(m:V)山豆根、肉豆蔻提取液的制备:分别称取山物质,山豆根提取液对多种病菌具有很好的体外抑菌豆根、肉豆蔻各100g,加250mL蒸馏水浸泡过夜,添加作用¨。肉豆蔻主要含有肉豆蔻精油、丁香酚等物5mL甘油作为乳化剂,加热至沸腾后文火煎熬20min,质,对多种病菌具有很好的抑制作用¨”。本试验是滤出汁液;再向残渣中加250mL蒸馏水煮沸20min,在前期研究山豆根和肉豆
5、蔻提取液对西兰花2种主要滤出汁液,合并前后2次药液并定容至500mL,冷却致腐菌一链格孢菌和核盘菌,抑菌效果较好的基础上,备用。进一步探索山豆根及肉豆蔻提取液对西兰花主要致腐1.2.2培养基的配制方法1.2.2.1马铃薯葡糖糖培养液¨:马铃薯500g,葡萄菌的抑菌机制。以期为中草药提取液在果蔬保鲜中的合理应用提供理论支持。糖50g,蒸馏水2500mL,pH值7.4。马铃薯去皮后切成小块,加水煮烂,用4层纱布过滤,再加葡萄糖,溶化后定容至2500mL,备用。收稿日期:3013-01-06接受日期:2013-06-04基金
6、项目:山东省自然科学基金项目(ZR2011CL009)作者简介:李文香,女,教授,主要从事农产品贮藏加工研究。E-mail:xiang7332@126.corn通讯作者:孙树杰,男,研发工程师,主要从事农产品贮藏加工研究。E-mail:sunshujie209@163.corn12期山豆根、肉豆蔻提取液对西兰花主要致腐菌抑菌效果研究1.2.2.2带药马铃薯葡糖糖培养液:按山豆根、肉豆核盘菌的菌体湿重均呈现先上升后下降的变化趋势;蔻提取液体积占培养液总体积(v/v)的20%分别配制CK组链格孢菌和核盘菌的菌体湿重上升速率
7、均较快,山豆根带药培养液和肉豆蔻带药培养液,分别装入9且菌体湿重的最大值分别出现在培养96和72h,分别个250mL锥形瓶中,每瓶装150mL,封口,121℃下灭达到0.90和1.59g。与CK相比,经山豆根和肉豆蔻菌20min。提取液处理的链格孢菌和核盘菌菌体湿重上升和下降1.2.3孢子悬液的制备方法用无菌移液枪分别取速率均比较缓慢,与CK相比菌体湿重差异显著(P<10mL无菌生理盐水于链格孢菌、核盘菌斜面培养基0.05)。上,振荡10min,使孢子分散均匀后,转移至另一无菌试管中,梯度稀释至105~106个·mL~
8、,即为待用菌悬液。孢子悬液的计数采用血球计数板法。1.2.4试验设计在无菌条件下,分别在添加山豆根、肉豆蔻提取液的培养基上接种链格孢菌、核盘菌孢子悬浊液1mL,于28~C条件下振荡培养,以不带药的马铃薯葡萄糖培养液为对照。定期用无菌移液枪移取02448729612O1445mL培养液,4000r·min~,离心10min,称量沉淀
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