生物化学实验复制.ppt

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1、生物化学实验上饶师范学院生物科学实验教学中心目录1.生物化学实验室规则2.生物化学实验基本操作3.实验一3,5——二硝基水杨酸比色定糖法4.实验二血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳5.实验三总氮量的测定——微量凯氏（Micro-Kjeldahl）定氮法上饶师范学院生物科学实验教学中心6.实验四脂肪碘值的测定7.实验五维生素C的定量测定8.实验六小麦萌发前后淀粉酶活力的比较9.实验七组织DNA的提取纯化10.实验八酪蛋白的制备上饶师范学院生物科学实验教学中心生物化学实验室规则（2课时）1每个同学都应该自觉遵守课堂纪

2、律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不大声谈笑。2实验前必须认真预习，熟悉本次实验的目的、原理、操作步骤，懂得每一操作步骤的意义和了解所用仪器的使用方法，否则不能开始实验。3实验过程中要听从教员的指导，严肃认真地按操作规程进行实验，并把实验结果和数据及时、如实记录在实验记录本上，文字要简练、准确。完成实验后经教师检查签字同意，方可离开实验实。上饶师范学院生物科学实验教学中心4实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用试剂用毕，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药品洒在实验台面和地上。实验完毕，仪器洗净放好

3、，将实验台面抹拭干净，才能离开实验室。5使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约。洗涤和使用仪器时，应小心仔细，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障须立即报告教师，不得擅自动手检修。上饶师范学院生物科学实验教学中心6实验室内严禁吸烟！注意水电安全，离开实验室前，必须关好水龙头，拉下电闸，严防发生事故！7废液倒入专门的废液桶，固体废物和带残渣的废物不得倒入水槽或到处乱扔。8仪器损坏时，应如实向教师报告，并填写损坏仪器登记表，然后补领。上饶师范学院生物科学实验教学中心9实验室内一切

4、物品，未经本室负责教师批准，严禁携出室外，借物必须办理登记手续。10每次实验课由班长负责安排值日生。值日生的职责是负责当天实验室的安全、卫生和一切服务性的工作。上饶师范学院生物科学实验教学中心生物化学实验基本操作（2课时）一.玻璃仪器的洗涤在生化实验中，玻璃仪器洁净与否，是获得准确结果的重要环节。洁净的玻璃仪器内壁应十分明亮光洁，无水珠附着在玻壁上。㈠常用的洗涤方法：1.一般仪器，如烧杯、试管等可用毛刷蘸肥皂液、合成洗涤剂仔细刷洗。然后用自来水反复冲洗，最后用少量蒸馏水冲洗2~3次，倒置在器皿架上晾干或置

5、于烘箱烤干备用。上饶师范学院生物科学实验教学中心2.容量分析仪器如吸量管、容量瓶、滴定管等，不能用毛刷刷洗。用后应及时用自来水多次冲洗，细心检查洁净程度，根据挂不挂水珠采取不同处理方法。（1）如不挂水珠，用蒸馏水冲洗、干燥，方法同上；（2）如挂水珠，则应沥干后用重铬酸钾洗液浸泡4~6小时，然后按上法顺序操作，即先用自来水冲洗，再用蒸馏水冲洗，最后干燥。上饶师范学院生物科学实验教学中心3.粘附有血浆的刻度吸量管等，有三种洗涤方法：（1）先用45%尿素溶液浸泡，使血浆蛋白溶解，然后用自来水冲洗；（2）也可用1

6、%氨水浸泡，使血浆溶解，然后再依次用1%稀盐酸溶液、自来水冲洗；（3）以上二法如达不到清洁要求，可浸泡于重铬酸钾洗液4~6小时，再用大量自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2~3次。上饶师范学院生物科学实验教学中心4.新购置的玻璃仪器，应先置于1~2%稀盐酸溶液中浸泡2~6小时，除去附着的游离碱，再用自来水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗2~3次。5.凡用过的玻璃仪器，均应立即洗涤，久置干涸后洗涤十分困难。如不能及时洗涤，先用流水初步冲洗后浸泡在清水中，待后按常规处理。上饶师范学院生物科学实验教学中心㈡使用重铬酸钾洗液

7、（以下简称洗液）时应注意以下几点：1.需用洗液浸泡的容器，在浸泡前应尽量沥干。否则会因洗液被稀释而降低洗液的氧化力。2.Hg2+、Ba2+、Pb2+等离子可与洗液发生化学反应，生成不溶性化合物沉积在容器壁上。因此，凡接触过上述离子的容器，应先除去上述离子（可用稀硝酸或5~10%EDTA钠清除）。3.油类、有机溶剂等有机化合物可使洗液还原失效。因此，容器壁上附有大量油类、有机物时，应先除去。上饶师范学院生物科学实验教学中心4.洗液的酸性和氧化性很强，使用时应格外注意，千万不要滴落在皮肤或衣物上，以免灼伤或烧

8、坏。5.洗液颜色由深棕色变为绿色时，说明洗液已经失效，应停止使用，更换新液。因重铬酸变成硫酸铬后不再具有氧化性。上饶师范学院生物科学实验教学中心重铬酸钾洗液的配制:取重铬酸钾20g溶于20ml蒸馏水中，加热至沸。冷却后再将200ml浓硫酸慢慢加入，边加边搅拌。注意：此时可产生高热。为防止容器破裂，应选用耐酸搪瓷缸或耐高温的玻璃器皿，切忌用量筒及试剂瓶等配制。为防止洗液吸收空气中的水分而被稀释变质，洗液应贮存于带盖的容器中。当清