酵母富铁发酵实验及方法学研究试验-论文.pdf

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1、本栏目主要介绍药物的对某一疾病的临床疗效，或者和另外一种药物的防治比较试验。欢迎来稿。E—mai：sysc．zn@163．coin酵母富铁发酵实验及方法学研究试验要瑞丽中泰财邦(天津)生物技术有限公司有机铁为蛋白质、肽、糖、有机酸等与铁元素通过络合培养基50mL，向培养基中加入一环活化的菌体。在28~(2、或螯合作用形成的有机铁配合物。目前有机铁的制备方法150r／min的条件下摇瓶培养12h，得种子液。有动物血液加工制剂、有机物成分与无机铁反应产物、微3．PH值对菌体收率的影响：由于PH值对Fe的稳定生

2、物发酵产物等。从原料来源和生产成本综合考虑，以酵性影响较大，所以在进行富铁发酵之前，研究了PH值对菌母微生物的富铁发酵比较实用。因为酵母菌是对发酵工业体收率的影响。最有贡献的菌种之一，也是最老的单细胞蛋白来源，是传在250mL的发酵瓶中，加入10~Bx麦芽汁培养基统的发酵剂。酵母菌富含丰富而全面的营养，安全无毒，发50mL，加入种子液5mL，用10％的酒石酸或氢氧化钠酵周期短，细胞产量高，工艺成熟。因此，它己经广泛应用(w／w)调节培养基PH值为3⋯456、7⋯89在28~(3、于畜禽喂养和人的食品添加剂

3、。以酵母为载体的微量元素I50r／rain的条件下摇瓶培养48h。铁具有稳定性好，吸收率高、抗干扰、与食品及饲料中其它对各PH值条件下，发酵液中菌体重的计算，按照以下成分协同配合性好，并具有良好风味等优点。研究富铁酵方法进行。对酵母菌培养液以5000~min的速度离心母的发酵制剂，将带动动物营养、饲料工业、应用基础和预15nfin，去上清夜，用双蒸水冲洗，再离心，重复冲洗沉淀菌混料生产等一系列技术的发展，其应用前景十分广阔。体3次，最后获得菌体，置于65~(3烘箱中干燥，以达到恒重一、酵母发酵富铁基础研究

4、的材料与试剂为止，称菌体干重(结果见表2-1)。菌种：啤酒酵母(Sac-charomycescerevisiae)，购自啤酒表2-1PH值对菌体收率的影响厂。无机铁：FeSO·7H：O，购自四川龙蟒有限公司菌重(g／L)2．84．36．25．76．35．65．4斜面培养基：葡萄糖20g／L，酵母粉lOg／L，蛋白胨从表2-1数据可见，PH值对菌体的影响情况，在PH10g／L，琼脂20g／L，MgSO4。7H200．5g／L，KH2PO2g／L，口5时，收率明显较低。在PH=5-8之间，菌体收率有一定VB1

5、0．1g／L，双蒸水。波动陛，且相差不是太大。考虑到Fe在碱性环境中的不种子培养基：10~Bx的麦芽汁培养基：用于培养种子；稳定性，应选择PH口7的发酵环境。在PH=5—7之间，菌用于研究发酵条件。10％的酒石酸或氢氧化钠(w／w)调节体收率相差不大，再考虑到酵母菌发酵过程中会产生有机PH值，研究PH值发酵产菌收率的影响；改变温度，研究酸，使体系偏弱酸性，最终的发酵环境可以选择体系的自发酵产菌收率的影响。改变铁离子浓度，用于研究富铁发然酸碱环境，PH=6，即不调节PH值大小。酵；为小试提供种子等。4．富铁

6、酵母生长周期：在250mL的发酵瓶中，加入二、酵母富铁发酵实验10~Bx麦芽汁培养基50mL，加入种子液5mL，在28qC、1．菌种活化：将购买的酵母菌种在无菌条件下，用接150r／nfin的条件下摇瓶培养。分别在培养的第0h、2h、4h、种环接种于上述斜面培养基上，于28~(2的温室中培养8h、12h、16h、20h、24h、28h、32h、36h、48h、72h取lmL酵母菌培养液稀释1o倍，以未接种的液体培养基做空白，在波瓶中，加入10~Bx麦芽汁长560mn处测定酵母菌培养液的OD值。根据OD值与

7、时间(T)的关系作生长曲线图2-1。母菌进行富集培养，培养到48h后，收获菌液，离心(6000r／min，1Stain)后弃上清液收获菌体。干燥至恒重后，图2-口01酵母生长曲线图准确称取0．2g菌体。使用原子吸收光谱法测铁的含量。ili叭0铁标准曲线的绘制：取6个容积为25mL的容量瓶，分别加入铁标准溶液0mL、0．25mL、0．50mL、0．75mL一100mL、1．25mL，用1％盐酸定容。在原子吸收分光光度计上点燃铁空心阴极灯，在波长为248．3nm下，将铁标准系列溶液逐一置于进样口，记录各标准溶

8、液的峰值，绘制标准曲线。样品消化处理：精确称取0．2g样品于30mL坩锅中，020406080l。。先小火炭化后再移入550~(2高温灰化炉中进行炭化，待样时间(h)品灰化成白色灰烬后取出，冷却后加入1：1盐酸5mL，加热根据酵母菌的生长曲线(图2-1)得知，酵母菌在蒸干，加入5％盐酸使之溶解，移入25mL容量瓶中定容，摇。一4h内处于诱导期，5-36h处于对数生长期，细胞生长速匀。同时作试剂空白试验。度快，生长旺盛，适应能力