间接免疫荧光操作步骤.doc

间接免疫荧光操作步骤.doc

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1、间接免疫荧光操作步骤:1.固定细胞。(固定液配方:甲醛和丙酮比例1:1)将配好的固定液加入细胞中,室温作用10min,2.PBS洗2遍,每次洗5min。3.封闭。封闭液为含1%BSA的PBST。37度静置作用1h。4.PBS洗2遍,每次洗5min。5.一抗作用。一抗稀释液为含1%BSA的PBST。37度静止作用1h。6.PBST洗4遍,每次洗5min。7.二抗作用。二抗稀释液为含1%BSA的PBST。37度静止作用1h。8.PBST洗4遍,每次洗5min。9.细胞核染色。DAPI染色,室温作用10min。10.PBST洗

2、2遍,每次洗5min。11.滴加缓冲甘油(含50%甘油的水溶液)

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