罗丹明B最新检测方法.doc

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1、罗丹明B最新检测方法下载 罗丹明B检测套装：固相萃取柱：HiCapt罗丹明B专用柱(500mg/6mL，订货号：25-05006)液相色谱柱：HisepC18-T 150mm×4.6mmi.d.,5μm（订货号：0246150）罗丹明B又称玫瑰红B,是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。然而,仍有不少食品生产企业将其作为食用色素。因此，建立快速可靠的检测方法非常重要。维泰克科技成功开发了罗丹明B专用SPE柱，建立了罗丹明B的快速检

2、测方法和实验室液相色谱检测方法，该方法快速、简单、溶剂用量少，回收率稳定重现，克服了传统方法中氧化铝固相萃取柱活性不易控制，方法回收率难以保证等缺陷。 方法的优势：·专利创新的罗丹明B专用萃取填料，有效去除食品中的天然色素和植物油等杂质干扰·回收率稳定、重现，克服了传统方法中氧化铝活性不稳定的缺陷·方法简单、快速、节省溶剂现场快速检测1.样品提取：1.1 辣椒粉 取辣椒粉一小勺（约1g）放入10mL离心管中，加入6mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）），涡混1分钟，静置，待上层液较为清澈，取上

3、清液3mL，准备过SPE柱。1.2 辣椒油 取辣椒油一小勺（约0.5g）放入5mL离心管中，加入3mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）），涡混1分钟，准备过SPE柱。2.过固相萃取（SPE）柱：HiCapt罗丹明B专用SPE柱（500mg/6mL）将1.1或1.2中准备的样品慢慢倒入小柱中，然后取3mL甲醇慢慢倒入小柱，含罗丹明B的样品在柱上部会出现红色条带，在紫外灯照射下为颜色明亮的桃红色荧光色带，条带边缘清晰，粉红色随含量的增加而加深和加宽，不含或者含量极低（低于0.1μg/g，罗丹明B的

4、着色下限）的罗丹明B的样品，提取液不会出现粉红色条带。发现罗丹明B的阳性样品需进行液相色谱实验确证。 液相色谱检测方法1实验部分1.1液相色谱条件色谱柱：HiSepC18（4.6mmX15cm，5μm）流动相：甲醇/20mM甲酸铵溶液(用甲酸调pH2.5)=7/3(v/v)流速：1mL/min                          进样量：20μL检测器:紫外UV/VIS）检测器             检测器波长：550nm1.2标准溶液的配制称取50mg罗丹明B于50mL棕色容量瓶，用甲

5、醇定容，即为1mg/mL。接着取母液500μL于50mL棕色容量瓶，用提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v））稀释到50mL，即为10μg/mL，作为储备液于4℃避光保存，且每周重新配制。每天所用的溶液是将储备液稀释为0.2-5μg/mL。1.3样品前处理1.3.1样品提取：1.3.1.1辣椒粉 取辣椒粉1.0g，放入10mL离心管中，加入6mL的提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）），涡混1分钟，超声10分钟，接着10000r/min离心5分钟，取上清液3mL，准备过SPE柱。 1.3.1.

6、2辣椒油 取辣椒油0.5g，放入5mL离心管中，加入3mL的提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）），涡混1分钟，准备过SPE柱。1.3.1.3腊肠、果脯等食品将食品切成小丁，再称取1.0g,放入10mL离心管中，然后步骤同2.3.1.1。1.3.2固相萃取柱净化：HiCapt罗丹明B专用柱(500mg/6mL)（1）活化：在HiCapt罗丹明B专用柱中依次加入2mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v））活化。（2）萃取：将待净化液加入柱中，再用200μL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1））淋

7、洗样品管，一并加入SPE柱中，让其自然地流过萃取柱。流出液弃去。（3）清洗：待上样液完全流出后，用3mL甲醇淋洗，淋洗液弃去。（4）解吸：3mL5%氨水的甲醇溶液解吸，用5mL的小样品管收集解吸液。（5）吹干及定容：解吸液50℃氮气吹干，加入200μL流动相溶解并定容。2结果与讨论2.1标准曲线与检出限将10μg/mL的罗丹明B储备液用流动相逐级稀释，配制1、0.5、0.2、0.1、0.05μg/mL标准溶液，制作标准曲线。由表1可见，罗丹明B的线性关系良好，相关系数的平方为0.99999。以性噪比的3

8、倍和10倍分别计算检出限（LOD）和定量限(LOQ),分别为16ng/g和53ng/g。表1线性回归方程、LOD及LOQ分析物线性范围线性回归LOD[ng/g](S/N=3)LOQ[ng/g](S/N=10)abr2罗丹明B0.05-2237178.95-1088.020.999991653*y=ax+b,y=peakarea,x=massconcentration[μg/mL]2.2回收率和精密度分别加入低、中、高3种质量浓度的罗丹明B标