低温蛋白酶产生菌的筛选及其酶学性质的初步研究.pdf

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1、第30卷第3期天津科技大学学报Vb1．30NO．32015年6月Jun．2015JournalofTianjinUniversityofScience&TechnologyDOI：10．13364~．issn．1672—6510．20140077低温蛋白酶产生茵的筛选及其酶学性质的初步研究莫清珊，张会图，田耀，孙同韦，冯士元，孙军，路福平(1．天津科技大学生物工程学院，天津300457；2．天津科技大学海洋科学与工程学院，天津300457)摘要：从南印度洋深海沉积物中筛选获得1株产低温蛋白酶的嗜冷菌株11815，经16S

2、rDNA鉴定，结合菌株的形态结构特征和生理生化特性分析，确定其为动性球菌属(Planococcussp．)．该菌株的最适生长温度及最佳产酶温度均为2O℃，经发酵条件初步优化后，48h内摇瓶水平的蛋白酶产量可达280U／mL；酶学性质分析结果显示：该菌株所产蛋白酶的最适作用温度为37℃，最适pH为8．0，30℃条件下可保持最高催化活力的80％zX上，而在25～30℃仍具有较高的催化活力(保持最高催化活力的50％~X上)．该菌株所产蛋白酶属于典型的低温蛋白酶，在常温下具有较好的催化活性，因此在食品加工业及冷水洗涤剂开发等方面

3、具有较高的研究价值．关键词：低温蛋白酶；动性球菌；分子鉴定中图分类号：Q786文献标志码：A文章编号：1672—6510(2015)03．0019．05ScreeningofCold—adaptedProteaseProducingPsychrophilesandtheirEnzymaticPropertiesMOQingshan，ZHANGHuitu，TIANYao，SUNTongwei，FENGShiyuan，SUNJun2，LUFuping(1．CollegeofBiotechnology，TianjinUnive

4、rsityofScience&Technology，Tianjin300457，China；2．CollegeofMafineScienceandEngineering，TianjinUniversityofScience&Technology，Tianjin300457，China)Abstract：Apsychrophilicbacterium11815wasisolatedfromthedeepseamudofsouthernIndianoceantoproducecold—adaptedproteaseandth

5、eproductwasidentifiedasPlanococcussp．accordingtoitsmorphologicalandphysiochemicalchar—acteristicsaswellas16SrDNAsequenceanalysis．Theoptimaltemperatureforitsgrowthandproteaseproductionwas20℃andtheproteaseproductionreached280U／mLafter48hfermentationinshakeflask．The

6、optimalpHandtemperatureforproducingproteasewere8．0and37℃．At30℃．therelativeactivityreached80％ofthehighestactivity．Evenatlowertern—peraturesfrom25℃to30℃。therelativeactivitystillreachedmorethan50％ofthehighestactivity．Theseenzymaticprop—ertiesindicatethattheproteasep

7、roducedbythenewlyisolatedpsychrophilicstrainbelongstotheclassofcold-·adaptedpro·-teasesandpossessesahighapplicationpotentialinfoodprocessingandcold—waterdetergents．Keywords：cold-adaptedprotease；Planococcussp．；molecularclassification低温蛋白酶是指最适催化温度在4O℃以下，并温或耐低温微生物l2

8、J．这些低温微生物为了适应其且在2O～30℃仍能保持较高酶活(50％以上)的一类所处的低温环境，常可表达分泌一些在低温条件下仍蛋白水解酶L1J．由于其最适催化温度接近自然环境中具有较高催化活性的胞外酶或胞内酶，因此从耐低温的温度，因此在应用过程中可省去加热或冷却过程，或嗜低温微生物中筛选获得低温蛋白酶已成为发掘与中高