木聚糖酶产生菌的筛选和酶学性质研究

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1、云南大学硕士研究生学位论文摘要摘要筛选到两株木聚糖酶高产木霉菌株—No.183和No.12菌株。数皮是No.12菌株产生木聚糖酶的最好的碳源，而玉米芯则是No.183菌株产酶最好的碳源。两菌株在接种到发酵培养基中后的第84小时产木聚糖酶最多。No.12菌株的酶活达到841U/ml,No.183菌株的菌株的酶活达到2991U/ml。此后酶活逐渐下降。在发酵过程中两种菌株的发酵液的pH都持续升高。研究了两种菌株木聚糖酶粗酶液的酶学性质。两种菌株粗酶液的最适反应温度都为50*C。最适pHNo.12菌株为5,No.183菌株为6。两种菌株的粗酶液在40℃以下，

2、pH5一7是相对稳定的。Cuz+对两菌株木聚糖酶活力有较强的促进作用，Fe'湘He有较强的抑制作用。对No.183菌株木聚糖酶粗酶液进行SDS-PAGE电泳分析发现该菌株产生两种木聚糖酶。一种的分子量为30KDa，一种的分子量为18.3KDao其中后者是No.183菌株产生的主要的木聚糖酶。另外，从土壤中筛选到了一株产耐碱木聚糖酶的细菌菌株H43。对H43菌株的16SrDNA做了系统发育分析，显示该菌株属于Cellulosimicrobium属中的一个种.该属菌株产木聚糖酶为我们首次报道。H43菌株产木聚糖酶发酵培养基的最适pH是9，最佳碳源是玉米芯，

3、最佳氮源是牛肉膏。H43菌株的木聚糖酶活力最高时可达到39.61U/ml.H43菌株的粗酶液的最适作用温度为60C，最适反应pH为8。在pH6-10之间和50℃以下时H43菌株粗酶液是稳定的。因此，H43菌株产生的木聚糖酶很适合用于制浆和造纸工业。关键词:木聚糖:木聚糖酶;制浆和造纸;酶活;木霉;云南大学硕士研究生学位论文摘要ABSTRACTTwostrainsofTrichoderma(Trichodermasp.183andTrichodermasp.12)withhighxylanase-productivitywerescreened.Whea

4、tbranandcorncobwerefoundtobethebestcarbonsourceinxylanaseproductionforTrichodernmsp.12andTrichodermasp.183,respectively.InthefermentationrunsintheErlenmeyerflasks,theenzymeactivityofthetwoisolatespeakedathour84,whenitwasupto2991U/mland84IU/mIforTrichodermasp.183andTrichodermasp.

5、12,respectively.AndthepHofthebrothkeptincreasing.Thecrudexylanasepreparationsfromthetwostrainswerealsoenzymologicallycharacterized.Theoptimumtemperaturewas500C.ThepHswereoptimazedat6.0forTrichodermasp.183and5.0forTrichodermasp.12,respectively.Thetwoenzymepreparationswererelative

6、lystableoveranabroadpHrangefrom5.0to7.0andthetemperatureblow400C.Fe3',H广exhibitedstronginhibitionontheactivities,whileCue'showedaremarkableenhancingefectTrichodermasp.183,withahigherproductivityofxylanase,wasthensubjectedtoSDS-PAGE.whichshowedthattwokindsofxylanaseswerepresented

7、andthemolecularmassforthechiefonewas18.3KDa,andtheotherwas30KDa.Althoughwithhighxylanase-production,thexylanasesofthetwoTrichodermastrainswerenotfitforpulpandpaperindustrybecauseoftheircharacters.Soitisnecessarytoscreenxylanase-producingbacteriaAbacteriastrain(H43)witharelativel

8、yhighxylanase-productivitywasisolatedfromsoil.B