超声波法提取山茱萸中熊果酸的工艺研究.pdf

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1、第4期湖南人文科技学院学报No．42008年8月JournalofHunanInstituteofHumanities，ScienceandTechnologyAug．2008超声波法提取山茱萸中熊果酸的工艺研究张如新，羊卫平，樊勤(邵阳学院生物与化学工程系，湖南邵阳422000)[摘要]采用k(34)正交试验，考察超声功率(A)、时间(B)、溶媒用量(c)和频率(D)四个因素对熊果酸提取的影响。得出超声波法提取山茱萸中熊果酸的最佳工艺参数：用15倍量无水乙醇浸泡24小时在输入功率40％下超声lOmino[关键词】超声波提取法；山茱萸；熊果酸；正交实验’

2、[中图分类号】TS201．1[文献标识码]A【文章编号]1673—0712(2008)04—0017—02、．山茱萸(cornu$officinalisSieb．etZuee)属山茱萸科股份有限公司；(3)LD3600高效液相色谱仪：北京凯奥科技(Comaeeae)的一种药用植物，又名山萸、山萸肉、肉枣、枣发展有限公司。皮、红枣皮、山芋、红子、药枣、实枣儿等⋯，主产于浙江，还1．3实验方法分布于安徽、陕西、河南等地。品质以浙江淳安所产最优。1．3．1原料处理因富含16种氨基酸(包括人体所必需的8种)、20多种矿除去山茱萸中的梗、核及其它杂质，不能有霉变的

3、山茱物质及常见的多种维生素等营养成分和熊果酸、齐墩果酸、萸，将其清洗干净，然后置于700C恒温干燥箱中干燥24小马钱素、山茱萸总皂甙等生理功能成分而成为一种公认的时，取出后用植物样本粉碎机粉碎，过40目筛，得山茱萸干传统名贵中药材[2】。它具有补肾益精、涩精固脱、抗菌利粉备用。尿、降糖降压的作用"】。熊果酸(Ursolicacid)又称乌索1．3．2超声波提取样品液的制备酸、乌苏酸，存在于天然植物中的一种三萜类化合物，具有1．3．2．1正交设计镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物考察超声功率(A)、时间(B)、溶媒无水乙醇用量(C)学效

4、应。近年来发现它具有抗致癌、抗促癌、诱导F9畸胎和超声频率(4)四个主要因素。设计因素和水平正交试验瘤细胞分化作用，极有可能成为低毒高效的新型抗癌药见表1。物H’5J。另外，熊果酸具有明显的抗氧化功能，因而被广泛表1超声波提取正交试验因素水平地用作医药和化妆品原料，随着熊果酸新功能发现对其用量明显增加，显示着熊果酸有广阔应用前景。本文以山茱萸为原料。采用近几年兴起的新方法超声波法提取熊果酸，通过研究优化该方法工艺条件，旨在提高熊果酸产率，为进一步开发利用山茱萸提供参考。1．3．2．2工艺流程，1试验材料与方法精密称取山茱萸粉末29一加入lOml无水乙醇，

5、浸泡1．1试验材料及试剂24小时一超声提取(样品温度<40℃)一滤纸过滤，充分洗(1)山茱萸：购于邵阳市中心大药房，经鉴定为药典正净残渣，将洗涤液合并于提取液中一用甲醇溶解定容至品；(2)熊果酸标准品：中国药品生物制品检定所，批号50ml得1—9号超声样品液一用0．45Ⅳn微孔滤膜过滤，取110742；(3)流动相：甲醇，色谱纯，天津市西华特种试剂厂滤液用HPLC含量分析。1．2主要仪器与设备1．3．3HPLC法测定提取物中熊果酸含量(1)FSJ一114型植物样本粉碎机：牧渔业扶沟科技仪1．3．3．1熊果酸标准样品的配制器厂；(2)JY92—2D超声波细

6、胞粉碎机：波新芝生物科技精密称取熊果酸对照品2．17mg，置于10ml容量瓶中，[收稿日期]2008一05—06．【基金项目】邵阳学院重点资助项目(2005816)[作者简介】张如斯(1965一)，男，湖南邵东人。邵阳学院讲师，主要从事基因功能、药用植物活性成分分离面的研究。·18·湖南人文科技学院学报总第103期用甲醇溶液定容至10ml。摇匀得熊果酸0．217mg／ml的对时，在功率为40％情况下超声10min为最优方案。照品溶液备用。表2正交实验结果1．3．3．2’方法学实验(1)色谱条件色谱柱：ZYll04一C18柱(Kromasil，5pan，2

7、50ram×4．6mm)；流动相：甲醇(色谱醇)；流速：1．0mL·min～；柱温：室温；检测波长：220nm。(2)熊果酸标准曲线的绘制分别精确吸取熊果酸标准品和样品液5、10、15、20止，按色谱条件进样测定，以进样量(峭)为横坐标，峰面积积分值A为纵坐标，得线性回归方程Y=O．074X一2516．475，r=0．983。．(3)精密度试验精密吸取上述对照品溶液(0．0217mg／mL)20出，重复进样5次，平均峰面积为533214，RSD(相对标准偏差)为1．80％。3结论(4)稳定性试验对同一熊果酸对照品溶液，每隔2小时测定一次，结果试验表明，采

8、用超声波法提取山茱萸中有效用成分熊平均峰面积为534013，RSD为2．1l％，