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《金银花的高效液相色谱指纹图谱和聚类分析.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第33卷第3期南昌大学学报(理科版)Vol.33No.32009年6月JournalofNanchangUniversity(NaturalScience)Jun.2009文章编号:1006-0464(2009)03-0253-04金银花的高效液相色谱指纹图谱和聚类分析1,21322胡海山,余燕影,万春花,鄢兵(1.南昌大学化学系,江西南昌330031;2.江西省分析测试研究所,江西南昌330029)摘要:采用AgilentTC-C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,在254nm波长下对15批不同产地和不同品种的金银花进行测定,建立了金银花的高效液相色谱指
2、纹图谱。采用程度相似度计算法结合聚类分析对15批金银花所共有的15个特征峰进行比较分析,从而对其质量和品质进行评价,判定结果与实际情况相吻合。通过实验方法学考察,表明该高效液相色谱指纹图谱法具有良好的精密度和重现性。该方法准确、可行,为金银花药材的质量控制提供实验依据。关键词:金银花;高效液相色谱;指纹图谱;聚类分析中图分类号:R284.1文献标识码:A金银花为忍冬科植物的干燥花蕾或带初开的谱工作站),梅特勒-托利多AL204型电子天平,花,又名银花、金花、忍冬花、金藤花等。金银花含有KQ-5200DE型超声波清洗器(昆山市超声仪器有黄酮类、有机酸类、肌醇、皂甙及鞣质等有效成限
3、公司)。[1]分,具有清热解毒、凉散风热等功效。研究表明绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所),木犀金银花的化学成分及其含量常会因其品种、产地、采草苷对照品(禾原天然产物科技有限公司)。乙腈、甲集期等不同而有所不同,因而使其疗效也有所差异。醇(色谱纯,Dikma公司),乙醇为分析纯,自制超纯水。传统的金银花药材质量控制仅以绿原酸为控制指15批金银花药材均购置各中药店,药材信息见标,显然该方法不能全面反映金银花的内在品质。表1。表115批金银花药材的产地和外观目前,中药材的质量控制大多以指纹图谱的方法进[2-4]样品号产地外观行监控,有关金银花的高效液相色谱指纹图谱法已有文献报道
4、[5-8],但在他们研究中存在着测定1山东蒙阴黄白色花,大部分花未开2山东邹城黄白色花,大部分花未开药材批数和品种较少、产地单一或是少数几个、指纹3山东费县淡青色花,夹带少量枯萎花图谱所得金银花的特征峰相对较少等不足。为了更4河南密县淡青色花,花未开科学全面地评价金银花质量品质,本实验收集了l55山东费县黄白色花,花未开个不同产地、不同品种的金银花品种进行了高效液6河南封丘黄白色花,夹带少量枯萎花相色谱指纹图谱测定,采集了金银花所共有的15个7山东苍山黄白色夹青色花,大部分花未开8河南密县褐色花,大部分花已开特征峰,采用程度相似度计算法,并结合聚类分析对9山东平邑淡青色夹黄白色
5、花,花未开金银花的质量进行综合评价。研究结果表明,该方310湖南褐色花,花朵小,夹有少量已开花法具有良好的系统性、特征性和重现性,能有效的区311江西褐色花,花朵小,大部分花已开分野生和人工种植金银花,该方法也为金银花的质12山东平邑黄白色花,花未开量控制提供了实验依据。13山东苍山黄白色花,大部分花未开14河南封丘黄白色花,花未开1实验部分15山东平邑黄白色花,花未开注:3为野生,其余为人工种植111仪器与试剂Waters2695型高效液相色谱仪(配Waters2996112色谱条件型二极管阵列检测器,自动进样装置,Empower2色色谱柱:AgilentTC-C18(250
6、mm×4.6mm,5收稿日期:2008-07-20作者简介:胡海山(1979-),男,工程师,硕士生.3通讯作者:余燕影(1963-),女,副教授。E-mail:yuyanying@ncu.edu.cn·254·南昌大学学报(理科版)2009年μm);流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),梯补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液,过0.45μm度洗脱,A:0～15min5%～15%,15～30min15%,微孔滤膜,即得。30～40min15%～25%,40～48min25%,48～50-12实验结果min25%～5%;流速:1.0mL·min;柱温:25℃;检测波长:2
7、54nm;进样量:20μL。211指纹图谱的建立113对照品溶液的制备在同一个色谱条件下,对收集的15批金银花进精确称取适量绿原酸对照品于棕色容量瓶中,行测定,比较各样品的HPLC指纹图谱,得15个共用纯甲醇定容至刻度,超声溶解,稀释,配制成15有特征峰,因此确定这15个峰为共有指纹峰。本实-1μg·mL的上机测定对照溶液;另精确称取适量木验中,采用绿原酸和木犀草苷两个组分作对照,比较犀草苷对照品于棕色容量瓶中,用纯甲醇定容至刻两个对照组分,发现绿原酸出峰时间居中且各样品-1度,超声溶解,稀
