草酸钙肾结石模型及其应用.pdf

《草酸钙肾结石模型及其应用.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、·750·国虫酉医结合竖痘杂志2OlO年8月第11卷第8期cJITWN，ALlgLlst2010．voI．11。N0．8草酸钙肾结石模型及其应用蔡华芳①肾结石主要由难溶性无机盐和基质两部分组成，无机盐占的钙结晶抑制剂，而THP可能是结构和表面的抑制剂。结石重量的90％，蛋白质占结石重量的1％～5％。无机盐的1．3遗传性高钙尿模型遗传高钙尿结石(GHS)大鼠模主要成分为草酸钙。其中一水草酸钙(COM)是肾结石中的主型和特发性高钙尿(IH)小鼠模型是人工繁殖的遗传模型，具有要晶形，它热力学最稳定，其次是二水草酸钙(C0D)，可能是结与特发性高钙尿症患者相同的病理生理改变，尿钙排出显著高石形成的前

2、驱体，在草酸钙结石中少量存在。草酸钙肾结石的于正常鼠，绝大部分会自然形成肾结石，因此，可作为特发性高模型研究是草酸钙结石的发生、发展机制，以及结晶的形成过钙尿症研究的理想动物模型。程和结晶一细胞相互作用的阐明的重要基础，因而受到广泛关GHS大鼠钙肠钙吸收增强，肾脏钙重吸收障碍以及骨无机注。本文将对草酸钙肾结石的模型研究进行综述。质再吸收增强，形成系统的钙平衡失调，尿排泄量高于正常大鼠的8～10倍。Evan等l6J采用第56代雄性GHS大鼠进行实1体内动物模型验，当饲以标准普通饲料(含1．2％钙和0．65％的磷)18周后，1．1乙二醇(EG)诱导产生高草酸尿模型EG是草酸的全部GHS大鼠形成非

3、结晶磷酸钙肾结石。当饲料中增加羟基前体，一般以1％EG加入动物饮水中，造成高草酸尿症。雄性脯氨酸增加尿中草酸排泄，导致草酸钙磷酸钙的尿过饱和度Wistar大鼠饮用1周即可成功造模，而小鼠则需更长时间，一变化，导致草酸钙肾结石的形成。当羟基脯氨酸达1％时，生成般4-6周可获成功。EG造模后除产生高草酸尿外，也因肾单磷酸钙结石，结晶仅存在尿腔，无肾小管损伤或增殖。当羟基位中毒造成肾组织的损伤，肾皮质、髓质、肾小管充血水肿，炎脯氨酸达3％时，形成磷酸钙和草酸钙混合结石，肾脏产生病性细胞浸润l1。肾乳头、髓质、皮质、肾盏内可见大量结石。理改变，而达到5％时仅形成草酸钙结石，肾脏产生病理改变EG模型属

4、于慢性结石，研究发现EG剂量与处理时问与高草更严重，肾乳头和肾盂的上皮局灶性增生，显示细胞增厚、肾上酸尿、草酸钙结晶沉积、肾小管损伤、结石细胞因子透明质酸皮结晶黏附和肾盂穹窿结晶俘获。结晶沉淀周围肾上皮细胞(HA)、骨桥蛋白(OPN)和CD4等的表达密切相关_2J，非常适合增生，OPN免疫染色增强，肾组织钙敏感受体mRNA表达也增结晶一细胞黏附及相关因子研究和药物筛选。但目前尚不能区加了2倍。别结晶结合到损伤／再生的细胞，还是结晶沉淀引起细胞损伤。经40代近亲繁殖出特发性高钙尿(IH)小鼠模型，小鼠特1．2基因敲除小鼠的高草酸尿模型通过同源重组删除发性高钙尿，且全部形成肾结石。模型小鼠肠道钙

5、吸收增加，OPN基因，OPN基因敲除小鼠显示正常的肾结构和功能。在肾小管重吸收缺陷及骨矿化减少，且骨、肠、肾组织中维生素D饮水中加人1％EG喂养4周后，OPN基因敲除小鼠显示高草受体(vDR)大量增加。酸尿水平，尿结晶的成分均为COD，肾小管内有COM结晶沉2体外培养细胞模型积，肾脏OPN表达显著上调，在肾皮质大约增加2倍，在肾髓质大约增加4倍l引。虽然不同种类培养的上皮细胞有明显差异，但培养的上皮通过胚胎干细胞同源重组，删除含邻近启动因子和外显子细胞在进行结晶黏附于肾上皮细胞的机制研究中十分关键。1-4Tamm—Horsfan蛋白(THP)基因片段，获得小鼠THP基添加草酸钙结晶悬液到培养

6、细胞表面，结晶与细胞共孵育一定因钝化4j。THP敲除型小鼠，‘肾脏THPmRNA表达缺陷，不时间后，利用SEM观察结晶与细胞表面的黏附，进行结晶一细合成THP蛋白，成年小鼠肾脏自发形成钙结晶。在高钙傅酸胞相互作用的研究。目前使用较多细胞模型有Madin—Darby盐的条件下，THP缺陷小鼠肾草酸钙结晶形成的频度和OPN犬肾脏(MIX：K)细胞、大鼠髓质内层集合管(IMCD)细胞、大鼠表达显著增加。草酸钙结晶集中于肾外髓的Henle袢升支区肾上皮细胞(NRK一52E)、原代培养的人肾脏细胞等。大鼠、域、深髓质和肾乳头的集合管内。THP的生理缺失，与不同。肾小鼠和人类绝大多数基因已确定因而在基因

7、和蛋白的调节与脏小管段的结石复发相关⋯。分析方面应用较多¨7J，利用生长中、融合单层、损伤单层细胞，研究发现约OPN基因敲除、THP基因敲除和OPN／THP观察基因和蛋白的差异表达。基因双缺陷小鼠，肾乳头形成自发性结晶沉积的频率分别是2．1Madin—Darby犬肾脏(MDCK)细胞模型MDCK细10％、14．3％和39．3％。THP基因型缺陷导致小鼠磷处理的胞最先从正常成熟雌性的考克斯班尼犬肾脏获得。培养的