_188_Re标记抗人前列腺癌单克隆抗体及其在荷瘤裸鼠体内.pdf

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1、第30卷第8期核技术Vol.30,No.82007年8月NUCLEARTECHNIQUESAugust2007188Re标记抗人前列腺癌单克隆抗体及其在荷瘤裸鼠体内的放射性分布11222张勇陈维真卢汉平梁昌盛刘长征1（中山大学附属第三医院核医学科广州510630）2（中山大学基础医学院实验核医学教研室广州510080）188摘要为探讨Re标记抗前列腺癌单克隆抗体7E11C5.3的方法及其生物学分布，采用2-巯基乙醇直接还原188法制备Re-7E11C5.3标记物，常规测定标记率和免疫活性，在荷瘤裸鼠体内检测标记物的生物学分布。结188果显示，Re-7E11C5.3的标记率为(93.16±2

2、.18)%，免疫活性分数为(74.86±1.86)%；经尾静脉注入裸鼠体内后，肿瘤组织摄取率在24h达高峰，非肿瘤组织在4h摄取率较高，以后均随时间延长逐步降低；血液放射性清除188迅速；24h时T/NT值达最大，至72h仍可保持在较高水平。结果表明，Re-7E11C5.3在裸鼠体内对前列腺癌移植瘤有良好的靶向定位作用，可用于前列腺癌放射免疫显像和治疗研究。188关键词前列腺肿瘤，抗体，单克隆抗体，Re中图分类号R737.251.2方法前列腺特异膜抗原(Prostatespecificmembraneantigen,PSMA)是导向诊断和导向治1.2.1188Re标记单克隆抗体采用2-ME

3、直接还原法[1]疗前列腺癌研究中最受关注的靶蛋白，其单抗标记[3]。7E11C5.3已被美国FDA批准应用于临床显像诊断(1)抗体的还原。100µg7E11C5.3加入2-ME[2]188前列腺癌转移病灶。Re具有良好的核物理特5µg，混匀后室温避光反应30min，混合物经性，既可显像又可治疗。本文研究了抗人前列腺癌188SephadexG-25柱分离，0.01mol/LPBS洗脱，考马单克隆抗体7E11C5.3的Re标记及其在荷瘤裸鼠斯亮蓝鉴定蛋白峰位，收集第一峰约1.0mL，加入体内的放射性分布。适量AA，无菌分装，冰冻保存。188-1材料和方法(2)ReO4的还原。7mgSnCl2溶

4、于1mLPBS中，以2mol/LHCl调至完全溶解，加适量AA保持1.1材料稳定性。取100μL亚锡溶液加入到100μL摩尔比1.1.1试剂抗前列腺癌单克隆抗体7E11C5.3(美国为13∶的柠檬酸-酒石酸溶液中，再加入新鲜淋洗188188的188ReO-3.7MBq/100μL，pH2.5，室温下反应Cytogen公司)、W-Re发生器(上海科兴药业公4司提供)、2-巯基乙醇(2-ME，上海化学试剂总厂)、30min。抗坏血酸(AA，广州化学试剂厂)、氯化亚锡(SnCl2，(3)标记。用1mol/LNaOH将刚还原后的广州化学试剂厂)、SephadexG-25(Sigma公司)、188-

5、ReO4溶液调成pH＝5.0，立即加入还原后的RPMI-1640培养液(Gibco公司)、胎牛血清(Hyclone7E11C5.3200μL，室温下振荡摇匀，反应2h。公司)、考马斯亮蓝G-250(上海源聚生物科技有限公(4)标记率的测定[4]。体系A：新华Ⅰ号滤纸作司)，其它试剂均为市售分析纯。188188固定相，生理盐水为展开剂；Re-7E11C5.3、Re-1.1.2细胞前列腺癌细胞株LNCaP购自北京大学188-188胶体Rf=0，ReO4、Re-配体Rf=0.8—0.9。体泌尿外科研究所，用含10%胎牛血清的RPMI-1640系B：5％牛血清白蛋白浸泡、干燥后的新华Ⅰ号滤培养液3

6、7℃、5%CO2开放培养，用0.05%胰酶/0.02%EDTA消化、传代。纸作固定相，乙醇∶氨水∶水＝2∶1∶5(V/V)为展188188188-1.1.3动物Balb/c雄性裸鼠4—6周龄，由本校中山开剂；Re-胶体Rf=0，Re-7E11C5.3、ReO4、188医学院动物实验中心提供。Re-配体Rf=0.8—0.9。——————————————广东省科技计划项目（2003B30103）第一作者：张勇，男，1968年出生，2004年于中山大学获博士学位，副主任医师，专业：核医学收稿日期：2007-03-16，修回日期：2007-04-27700核技术第30卷188188标记率=(Re-

7、7E11C5.3+Re-胶体)A放射性/2结果188总放射性×100%－Re-胶体B放射性/总放射性2.1抗体的标记×100%。188[5](5)Re-7E11C5.3免疫活性测定。将对数期前列腺癌单克隆抗体7E11C5.3经过2-ME还188生长的LNCaP细胞进行倍比稀释，使各测定管分别原，在亚锡-柠檬酸-酒石酸溶液中与Re结合形成#6#6188含1：3.3×10个/0.5mL、2：1.6×10个/0.5mL、Re-