99tcm-survivin+mrna反义肽核酸在人肺癌a549荷瘤裸鼠体内分布及显像的研究

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2、的研究成果，除了文中特别加以标注等内容外，文中不包含其他人己发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究蝼名：龋翩麟月7日目录IIllllllllrlflllllllIIlIlllflllllUllflHffrlY1901233．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

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5、3de因放技，段构(Gly．(D)．Ala．Gly．Gly．)，形成1个类似N4结构的强螯合基团，为消除空间阻碍，引入1个P氨基丁酸(4．aminobutyricacid，Aba)作为隔离物，然后利用配体交换法进行99Tcm标记。以同样方法对无义肽核酸片段5’．TACCGTCTGCGA．3’进行99Tcm标记。采用高效液相色谱法(hi曲performanceliquidchromatography，HPLC)对标记物进行鉴定，测定标记物的保留时间及放射性化学纯度。以纯乙腈为展开剂，分别用聚酰胺凝胶膜和快速硅胶纸两种快速薄层层析法(instantthin．1ayerchromatography

6、,ITLC)对标记物即刻标记率进行综合测定，并测定与人新鲜血清37℃保温24小时后的标记率，检测探针的体外稳定性。采用贴壁法培养人肺癌A549细胞，收获对数生长期的细胞，制备成1x107个／0．2ml生理盐水的单细胞悬液，接种到4周龄的雌性裸鼠的右前肢皮下，约14天后成瘤，待肿瘤直径长至l～1．5cm时，选取肿瘤形态规则，色泽红润，中心无坏死的荷瘤裸鼠纳入实验。利用Rt．PCR实验检测人肺癌A549细胞及肿瘤组织中survivin基因mRNA的表达情况。细胞摄取率及滞留率实验初步探讨反义肽核酸在肺癌A549细胞中的药代动力学作用。抽取30只荷瘤裸鼠，随机分为反、无义体内分布组，每组又分为l、

7、2、4h三个亚组，各5只，每只荷瘤裸鼠经尾静脉注射99TCm标记的survivinmRNA反义或无义PNA(740kBq／0．1m1)后，分别于1、2、4h将对应各组荷瘤裸鼠眼静脉采血，处中文摘要死并解剖各组织或脏器，分别测定血液、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、胃、肠道、脑、骨骼、肌肉及肿瘤等组织的重量及放射性计数，并测定相同时刻标准源的放射性计数，计算每克组织中放射性计数占标准源总放射性计数的比值(％ID／