大黄素诱导裸鼠体内白血病K562细胞凋亡过程中P13KAKT.pdf

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1、肿瘤2011年7月第31卷第7期TumorVo1．31，July2011www．tumorsci．org573DOI：10．3781／j．issn．1000—7431．2011．07．001Copyright~2011byTUMOR基础研究·BasicResearch大黄素诱导裸鼠体内白血病K562细胞凋亡过程中PI3K／AKT通路相关分子表达的变化王春光，刘北忠，曾丽，刘永立，刘俊霞，刘谢添，王维1．重庆医科大学附属永川医院肿瘤科永川402160；2．重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016[摘

2、要】目的：观察大黄素作用后裸鼠体内白血病K562细胞PI3K／AKT信号通路的分子变化，以探讨大黄素是否依赖PI3K／AKT信号通路参与K562细胞凋亡发生。方法：建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型，腹腔连续给药12d后，处死裸鼠，称取瘤体质量，计算抑瘤率。采用HE染色和透射电子显微镜观察肿瘤细胞的凋亡情况。应用RT—PCR法检测肿瘤组织中PI3K、AKT和FoxO3a的mRNA表达水平。蛋白质印迹法检测肿瘤组织中PI3K、AKT和FoxO3a蛋白的表达水平。结果：低、中、高剂量组大黄素作用后肿瘤相对体积(V／)分别为8．9

3、0±0．24、5．62±0．17和2．06±0．31，与0．9％氯化钠溶液对照组(V／为11．83±0．47)相比，大黄素处理组的肿瘤体积明显缩小，差异具有统计学意义(P

4、血病K562细胞裸鼠移植瘤的生长，其机制可能与其抑制PI3I，√AI信号转导通路有关。[关键词】白血病，实验性；大黄素；异种移植模型抗肿瘤试验；细胞凋亡；基因表达；小鼠，近交BALBC；K562细胞；PI3I，√AI(T信号转导通路【中图分类号】R733．7【文献标志码】A[文章编号]1000—7431(2011)07—0573—07ChangesofmolecularsinvolvedinPI3K／AKTpathwayinemodin-inducedapoptosisofhumanleukemiaK562cellsinnu

5、demiceWANGChun—guang。，LIUBei—zhong，ZENGLi。，LIUYong—li。，LIUJun—xia。，LIUXie-tian。。WANGWei。1．DepartmentofOncology，YongchuanHospital，ChongqingMedicalUniversity，Yongchuan402160。China；2．KeyLaboratoryofChJnicalLaboratoryDiagnosticsofMinistryofEducation，DepartmentofLaborat

6、oryMedicine，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016，China[ABSTRACT]Objective：Toobserveemodin-inducedmolecularchangesinPI3K／AKTsignalingpathwayinhumanIeukemiaK562ceIIstransPIantedirltoBALB／cnudemice，andtoexPIorewhetheremodininducestheapoptosisofK562cellsthroughPI

7、3K／AKTsignalingpathway．Methods：ThesubcutaneouslytransPIantedtumormodelOfhumanK562ceIlsinnudemicewasestablished．AftercontinuousIYintraperitonealiniectionwithdifferentdosesofemodinfor12d。themiceweresacrificed．ThenthetumorweightandvoIumeweremeasured．andthetumorinhibit

8、ionratewascaIcuIated．Emodi13一inducedapoptoticm0rphOl0gicalchangesofK562cellsweredetectedbyHEstainandscanningelectronmicroscoPY．RT—PCRandWesternbI