齐墩果酸对体外培养的人白血病NB4细胞增殖的影响费.pdf

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1、齐齐哈尔医学院学报2011年第32卷第4期505论著齐墩果酸对体外培养的人白血病NB4细胞增殖的影响李鸿梅王冬霞汪积嬴周丽张晓杰摘要目的用体外培养法探讨齐墩果酸(oleanolicacid,OA)对人急性早幼粒细胞白血病NB4-1细胞生长的抑制作用。方法40、60、80和100molL的OA分别处理体外培养的人白血病NB4细胞24、48和72小时后,MTT法检测OA对NB4细胞增殖的影响。结果OA在体外具有明显的细胞毒性,可抑制NB4细胞增殖,且呈现时间和剂量依赖性。结论OA在体外可有效抑制人白血病NB4细胞的生长。关键词齐墩果酸急

2、性早幼粒细胞白血病NB4细胞增殖EffectofoleanolicacidontheproliferationofhumanleukemiaNB4cellsinvitroLIHong-mei,etal.(CentralLaboratory,QiqiharMedicalCollege,Qiqihar,Heilongjiang161006,theP.R.China.)AbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofoleanolicacidontheproliferationofacutepro-myelocyticleukemia

3、NB4cellsinvitro.MethodsMTTassaywasusedtoevaluatetheproliferationofNB4cellsaftertreatedwithOA(40,60,80and100molL-1)for24,48,and72hoursinvitro.ResultsOAproducedcytotoxiceffectonNB4cellsinvitroandcouldobviouslyinhibitproliferationofNB4cellsintimeanddose-dependentmanner.ConclusionsOAcaninh

4、ibittheproliferationofacutepromyelocyticleukemiaNB4cellssignificantly.KeywordsOleanolicAcidAcutePromyelocyticLeukemiaNB4Cellproliferation白血病是一种常见的起源于造血前体细胞的恶性肿瘤,95%湿度条件下培养。为避免由于细胞密度过大而给细胞生在我国的发病率较高。白血病的治疗一直以化疗和骨髓移植长和生存带来的可能的影响,每天通过增加新鲜的培养基来调整细胞密度,使细胞密度不超过5105cellml-1。为主,造血干细胞的骨髓移植

5、因配型困难而难以推广,化疗对机体正常细胞的毒性作用一直以来也难以解决。因此,从天1.2.2齐墩果酸对NB4细胞增殖的影响取对数生长期的然药物中寻找抗肿瘤活性成份,成为当今抗肿瘤药物发展的NB4细胞,将细胞转移至15ml的离心管中,1000rpm离心重要方向之一。10min,用新鲜的含10%小牛血清的RPMI-1640培养基将细胞密度调整为5104cellml-1的细胞悬液后,将细胞接齐墩果酸(oleanolicacid,OA)广泛存在于世界各地的食4物、医学草本植物和其他植物中,有多种药理作用。张东方种于三块96孔培养板。每孔加细胞悬液200l(110等[1]人研

6、究发现,齐墩果酸具有抗人肺癌细胞增殖、侵袭并诱cell),然后加入齐墩果酸,使其终浓度分别为40、60、80和导细胞凋亡的活性。Hsu等[2]研究发现OA抑制小鼠体内肿100molL-1,每毫升细胞培养液中DMSO不超过50l。瘤生长并恢复放射后造血功能,但是在体外条件下OA对白每个浓度均设3个平行孔,调零孔不加NB4细胞悬液,只加血病NB4细胞的作用未见报道。本实验以NB4细胞为研究含10%小牛血清的RPMI-1640。细胞分别培养24、48和72h。实验终止前4h每孔加入5mgml-1的MTT磷酸盐缓对象,观察不同剂量的OA对其增殖的影响,为抗白血病药物的筛选和天

7、然药物的开发提供理论和实验依据。冲液20l,同样条件下继续培养4h,终止培养。1000rpm离1材料与方法心10min,弃上清。每孔再加入DMSO200l,振荡10min1.1材料人白血病细胞NB4购自中国科学院上海细胞后,用酶标仪在波长490nm处测定吸光度值。按下面公式计库;齐墩果酸购自中国药品生物制品检验检定所。齐墩果酸算细胞生长抑制率(inhibitionratio,IR,%)=(1-实验孔用DMSO溶解配制成浓度为80mmolL-1的原液,-20OD490/对照孔OD490)1

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