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《高三尖杉酯碱对白血病原癌基因bcl_2_c_myc_抑癌基因p15.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、临床合理用药2010年4月第3卷第7期ChinJofClinicalRationalDrugUse,April2010,Vol3No715论著高三尖杉酯碱对白血病原癌基因bcl2、cmyc、抑癌基因p15的影响邓建群摘要!目的探讨高三尖杉酯碱对白血病治疗作用的机制。方法用细胞培养、DNA片段凝胶电泳、Westernblot和cDNA阵列杂交等方法检测高三尖杉酯碱对白血病HL60细胞凋亡及原癌基因表达的影响。结果高三尖杉酯碱使HL60细胞、bcl2蛋白表达明显较低,cmyc表达较弱,而p15表达较强。
2、结论高三尖杉酯碱抑制HL60细胞增殖、诱导其分化和凋亡,其机制可能与高三尖杉酯碱下调原癌基因bcl2、cmyc及上调抑癌基因p15有关。关键词!白血病;高三尖杉酯碱;细胞凋亡;原癌基因+中图分类号!R733.5;R979.19文献标识码!A文章编号!1674-3296(2010)07-0015-02Theimpactofhomoharringtoninetoleukemiaprotooncogenebcl2、cmyc、tumorsuppressorgenep15DENGJianqun.DepartmentofPh
3、armac,People∀sHospitalofJiahe,Hunan,Jiahe424500,ChinaAbstract!ObjectiveToexplorethetherapeuticmechanismofhomoharringtonineforleukemia.MethodsDetectedtheimpactofhomoharringtonineforHL60cellapoptosisandexpressionofprotooncogeneusingcellculture,DNAfragmentsgelelectrophore
4、sis,WesternblotandcDNAarrayhybridizationetc.ResultsHomoharringtoninepromotedtheexpressionofHL60cells,bcl2proteinweresignificantlylower,cmycexpressionisweak,whilestrongexpressionofp15.ConclusionHomoharringtoninecaninhibittheproliferationofHL60cel,linduceitsdifferentia
5、tionandapoptosis,itsmechanismmayberelatedtohomoharringtoninecanbeweakenedprotooncogenebcl2,cmycandenhancep15tumorsuppressorgene.Keywords!Leukemia;Homoharringtonine;Apoptosis;Protooncogene高三尖杉酯碱(HHT)是从我国特有植物海南粗榧属植物照组的HL60细胞,进行mRNA分离和纯化(具体按试剂盒操的总生物碱中分离出的一种有效抗癌药物,我国将其
6、首先用于作说明),DNA抽提凝胶电泳。白血病的治疗,并取得显著的临床疗效。为探讨其对白血病治1.4.2cDNA探针标记与纯化:在0.5mlPCR管中,加入poly疗的作用机制,笔者应用细胞培养、DNA片段凝胶电泳、WestA+RNA2l、10#CDSprimermix1,l于微量离心机上轻轻混ernblot和cDNA阵列杂交等方法检测高三尖杉酯碱对白血病匀,置PCR仪上,70∃2min,50∃2min,加5#reactionbuffer13HL60细胞凋亡及原癌基因表达的影响,旨在为进一步从凋亡2、l10#dNTPs1l、(a
7、32P)dATP(37#10Bq/L)3.5l、DTT7启动的角度来研究HHT诱导细胞凋亡机制奠定基础。(100mmol/L)0.5l、MMLVRTase(5#10u/L)1,l于微量离1材料与方法心机上轻轻混匀,置PCR仪上,50∃30min,加1l10#termi1.1试剂RPMI1640培养基粉(GIBCO产品),新生牛血清nafionmix终止反应。取凝胶过滤层析柱,将样本缓缓加入柱(newbornbovineserum,NBS)(杭州四季青生物工程材料研究中央,待样本完全流入后,加40l去离子水,使其完全流入柱
8、所产品,批号:20040516),HHT(常州制药厂),检测bcl2的中,再加250l去离子水,等其完全流入柱中后,加100l去离Westernblot试剂盒
